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生物素化蛋白质的技术资料

2024-10-23 分享

生物素化蛋白质

生物素化蛋白质同时具备了高亲和力、高特异性和高灵敏度的优点,因此生物素-亲和素系统广泛用于荧光成像、蛋白质印迹和ELISA检测等。生物素偶联小分子在药物研发过程中也有着广泛的应用前景,如针对于生物素受体的靶向给药,以及小分子探针应用于药物靶标验证等。

生物素(Biotin,又称vitamin B7)是一种水溶性B族维生素,分子结构由杂环核心与戊酸侧链组成,如图1所示。生物素是生命领域的重要辅酶,生物素酶家族利用生物素固定、转运和除去CO2。

生物素化蛋白质

图1.生物素及其衍生物结构


生物素与链霉亲和素及亲和素的非共价相互作用是已知的*强的蛋白-配体相互作用[2],如图2a所示,这种紧密而特异性的结合是快速的,并且能够承受pH,温度,有机溶剂和变性剂等极端作用。生物素及其衍生物中的反应位点可以于蛋白质中氨基、羧基和巯基等基团进行反应,使其能够以共价键的形式进行标记蛋白,而不影响其活性。这使得生物素成为标记蛋白或大分子的理想选择,如图2c、2d标记方法是通过氨基反应或巯基反应将生物素偶联到蛋白上。

生物素标记蛋白原理

图2.生物素标记蛋白原理