生物素化试剂与生物素化偶联物
生物素化试剂带有一个“尾巴”,可将非常难检测的分子整合到探针上,使之可被标记过的检测试剂或者具有亲和捕获能力的基质所识别。在被标记上生物素或者半抗原尾巴之后,靶标分子(例如抗体、凝集素、药物、多聚核苷酸、多糖或受体配基)可用于检测复合物溶液、细胞、组织以及蛋白、核酸斑点与芯片。我们提供全面的产品用于检测已经被生物素标记的分子或生物分子,同时也提供用于标记蛋白和抗体的试剂盒。
生物素标记服务是一项将生物素(Biotin)分子通过化学或酶促方式共价连接到目标分子(如蛋白质、多肽、核酸、抗体、糖类或纳米材料)上的专业定制服务,广泛应用于生物学研究、诊断试剂开发、药物筛选、靶向递送系统、免疫分析等多个领域。由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)之间具有极高的亲和力(Kd ≈ 10⁻¹⁵ M),生物素化的分子可以非常高效地与亲和素偶联物结合,实现稳定、高特异性的标记和捕获。
生物素化学式
服务内容包括:
标记策略定制
根据客户提供的目标分子种类与实验用途(如ELISA、Western Blot、流式细胞术、免疫组化、纳米载体功能化等),选择适合的标记策略和反应条件。标记方式包括通过氨基、巯基、羧基或糖基进行共价结合,确保目标活性不被破坏。
标记试剂选择
提供多种类型的生物素衍生物(如NHS-Biotin、Maleimide-Biotin、PEGylated-Biotin、Long Arm Biotin等),适配不同分子的结构特性,确保标记效率高、结构稳定性好、无自发聚集。
反应优化与纯化
采用优化的反应缓冲体系和温度控制,避免生物分子的变性或活性丧失。标记反应后通过透析、超滤、凝胶过滤色谱或亲和纯化方式去除游离生物素,确保标记产物纯度。
质量检测与验证
提供完整的质控检测服务,包括:
SDS-PAGE 或 Western blot 检测标记后的分子大小和纯度
HABA/Avidin displacement assay 测定标记度(Biotin/molecule)
LC-MS 或 MALDI-TOF 检测精确质量
功能检测:确认标记产物是否保留原始的生物活性或结合能力。
定制规模灵活
可提供从μg级到g级不同产量的服务,适应科研开发、小试放大和产业化前期需求。
生物素标记的大致流程:
生物素标记简易流程图
生物素标记的原理
蛋白中含有大量的氨基、羧基和巯基等基团,这些基团均可作为偶联生物素的位点。常见的生物素标记方法是通过氨基反应或巯基反应将生物素偶联到蛋白上(如下表和图2所示)。
通过氨基反应或巯基反应的标记方法相对更成熟,且操作简单快捷,是目前应用广泛的生物素标记手段。
典型应用示例:
抗体/蛋白标记:用于ELISA或免疫检测系统中,与链霉亲和素-辣根过氧化物酶(HRP)或荧光标记亲和素配合使用。
多肽与小分子标记:用于构建靶向识别探针或成像分子。
核酸生物素化:用于分子杂交、捕获和PCR富集等应用。
纳米材料功能化:如金纳米颗粒、生物探针、磁珠表面接枝生物素,用于可控靶向和生物识别。
生物素标签的应用
生物素标签的应用在许多蛋白质研究应用中,生物素标记(即生物素化)的蛋白质常规用Streptavidin结合物检测或纯化,包括
酶联免疫吸附试验 (ELISA)
免疫组织化学 (IHC)
Power Styramide 信号放大,是酪胺的替代品
免疫印迹
免疫荧光显微镜
细胞表面标记
亲和纯化
荧光细胞分选 (FACS)
流式细胞术