AF647-TPP，AF647标记磷酸三苯酯，Alexa Fluor 647 荧光染料

AF647-TPP，AF647标记磷酸三苯酯，Alexa Fluor 647 荧光染料

AF647-TPP 是将近红外荧光染料 Alexa Fluor 647（AF647）与线粒体靶向基团磷酸三苯酯（TPP）相连的化合物。AF647 较大激发波长约为 647nm，发射波长约为 668nm，具有荧光强度高、光稳定性好、量子产率高等优点，在近红外区域成像时，能有效减少生物组织的自发荧光干扰，提高检测灵敏度。TPP 带有正电荷，凭借线粒体膜电位的差异，可特异性地富集于线粒体中，使得 AF647-TPP 能精准定位线粒体。这种化合物广泛应用于线粒体相关的细胞生物学研究，如线粒体的形态观察、功能检测以及线粒体动力学研究，还可用于监测药物对线粒体的作用机制和毒性评价。

合成方法：

原料准备：准备 AF647 的 NHS 酯（活性形式）、磷酸三苯酯（TPP）、无水 N,N - 二甲基甲酰胺（DMF）、三乙胺（TEA）。

反应过程：在氮气保护下，将 TPP 溶解于无水 DMF 中，加入适量的 TEA 调节反应体系 pH 至弱碱性。缓慢滴加 AF647 的 NHS 酯的 DMF 溶液，滴加过程中保持低温搅拌（0 - 5℃）。滴加完毕后，将反应温度升至室温，继续搅拌反应 12 - 24 小时，期间可通过薄层层析（TLC）监测反应进程，展开剂可选用氯仿：甲醇（9:1，v/v）体系。

产物纯化：反应结束后，将反应液缓慢滴加到大量冷乙醚中，使产物沉淀析出。离心收集沉淀，用冷乙醚多次洗涤，以除去未反应的原料和杂质。将粗产物通过硅胶柱层析进一步纯化，洗脱剂为二氯甲烷：甲醇（95:5，v/v），收集含有目标产物的洗脱液，减压蒸馏除去溶剂，得到纯净的 AF647-TPP。通过质谱（MS）和核磁共振氢谱（¹H NMR）对产物结构进行表征确认。

名称：AF647-TPP，AF647标记磷酸三苯酯，Alexa Fluor 647 荧光染料

纯度：95%+

储藏条件：-20°C干燥避光保存

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

保存：冷藏

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