Cy5-PEG-CRGDFK,花菁染料CY5-聚乙二醇-多肽是一种多功能荧光探针
Cy5-PEG-CRGDFK,花菁染料CY5-聚乙二醇-多肽
Cy5-PEG-CRGDFK 是一种多功能荧光探针,由三部分组成:
Cy5(Cyanine5):近红外荧光染料,激发 / 发射波长约 646/662 nm,具有高灵敏度和低背景干扰特性,广泛用于活体成像和流式细胞术。
PEG(聚乙二醇):亲水性聚合物链,可增加分子水溶性、延长体内循环时间,并减少非特异性蛋白吸附。
CRGDFK:靶向多肽序列(Cys-Arg-Gly-Asp-Phe-Lys),可特异性识别整合素 αvβ3(ανβ3)受体,该受体在肿瘤血管生成和转移中高表达。
名称:Cy5-PEG-CRGDFK,花菁染料CY5-聚乙二醇-多肽
纯度:95%+
储藏条件:-20°C干燥避光保存
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
合成方法
Cy5-PEG-CRGDFK 的合成需分步进行,涉及 PEG 活化、染料偶联及多肽连接,具体步骤如下:
PEG 链的活化
选用一端为氨基(-NH₂)、另一端为活性酯(如 NHS 酯)的 PEG(如 NH₂-PEG-NHS,分子量根据需求选择,通常为 2000-5000 Da)。
将 PEG 溶解于无水二甲基亚砜(DMSO)或 N,N - 二甲基甲酰胺(DMF)中,加入过量 N - 羟基琥珀酰亚胺(NHS)和 1 - 乙基 - 3-(3 - 二甲基氨基丙基) 碳二亚胺盐酸盐(EDC),室温搅拌 2 小时,活化羧基末端为 NHS 酯。
Cy5 染料的偶联
取 Cy5-NHS 酯(预活化的 Cy5 染料)溶于 DMSO,逐滴加入活化后的 PEG 溶液中,调节 pH 至 8.5-9.0(使用三乙胺或碳酸氢钠缓冲液),避光反应 4-6 小时。
反应完成后,通过透析(截留分子量 3500 Da)或凝胶过滤层析(如 Sephadex G-25)去除未反应的 Cy5 和小分子杂质,得到 Cy5-PEG-NHS 中间体。
多肽 CRGDFK 的连接
合成多肽 CRGDFK(序列:Cys-Arg-Gly-Asp-Phe-Lys),其 N 端含游离氨基(-NH₂),C 端为羧基(-COOH)。
将 Cy5-PEG-NHS 溶解于 DMSO,加入多肽溶液(pH 8.0-8.5),室温避光搅拌 12-18 小时,使 NHS 酯与多肽的氨基反应形成稳定酰胺键。
反应结束后,通过高效液相色谱(HPLC)或反相柱层析(C18 柱)纯化产物,使用质谱(ESI-MS)验证分子量(理论值需包含 Cy5、PEG 及多肽片段)。
产品
CY3-Taurine,CY3标记牛磺酸,CY3-PEG-Taurine
CY5-Bilirubin,CY5标记胆红素,CY5-PEG-Bilirubin
CY7-Taurine,CY7 标记牛磺酸,CY7-PEG-Taurine
5-FITC-DBCO,5-FITC-二苯基环辛炔
CY3.5-sucrose,CY3.5标记蔗糖,CY3.5-PEG-sucrose
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