HRP-Alkyne,辣根过氧化物酶-炔基的合成方法
2025-03-04
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HRP-Alkyne,辣根过氧化物酶-炔基
HRP-Alkyne 是辣根过氧化物酶(HRP)与炔基(-C≡CH)偶联的生物共轭物,分子量约 44 kDa。其通过 HRP 表面的氨基与炔基活化试剂(如丙炔酸 - NHS 酯)反应形成稳定酰胺键。该偶联物保留了 HRP 的催化活性(催化 H₂O₂氧化底物),同时炔基可参与点击化学反应。主要用于免疫检测(ELISA)、蛋白质印迹(Western blot)及原位成像。
合成方法:
合成步骤如下:
HRP 活化:将 HRP 溶解于 pH 7.4 的磷酸盐缓冲液,加入过量丙炔酸 - NHS 酯(溶于 DMF),冰浴搅拌 2 小时。
终止反应:加入甘氨酸溶液淬灭未反应的 NHS 酯。
透析纯化:通过 PD-10 柱或透析去除游离炔基试剂,得到 HRP-Alkyne 溶液。
活性测定:使用邻苯二胺(OPD)和 H₂O₂检测 HRP 活性,通过 SDS-PAGE 分析偶联效果。
产品名称:HRP-Alkyne,辣根过氧化物酶-炔基
纯度:95%+
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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定制服务
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.03.04