HRP-Alkyne，辣根过氧化物酶-炔基的合成方法

HRP-Alkyne，辣根过氧化物酶-炔基

HRP-Alkyne 是辣根过氧化物酶（HRP）与炔基（-C≡CH）偶联的生物共轭物，分子量约 44 kDa。其通过 HRP 表面的氨基与炔基活化试剂（如丙炔酸 - NHS 酯）反应形成稳定酰胺键。该偶联物保留了 HRP 的催化活性（催化 H₂O₂氧化底物），同时炔基可参与点击化学反应。主要用于免疫检测（ELISA）、蛋白质印迹（Western blot）及原位成像。

合成方法：

合成步骤如下：

HRP 活化：将 HRP 溶解于 pH 7.4 的磷酸盐缓冲液，加入过量丙炔酸 - NHS 酯（溶于 DMF），冰浴搅拌 2 小时。

终止反应：加入甘氨酸溶液淬灭未反应的 NHS 酯。

透析纯化：通过 PD-10 柱或透析去除游离炔基试剂，得到 HRP-Alkyne 溶液。

活性测定：使用邻苯二胺（OPD）和 H₂O₂检测 HRP 活性，通过 SDS-PAGE 分析偶联效果。

产品名称：HRP-Alkyne，辣根过氧化物酶-炔基

纯度：95%+

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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