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CY5.5-SPDP的物质组成与结构

2025-03-18 分享

产品名称:CY5.5-SPDP的物质组成与结构

1. 物质组成与结构

CY5.5:

推测:基于Cy5(发射波长~650 nm)优化的近红外染料,发射波长可能在670-700 nm之间,适用于深部组织成像。

结构:含花青骨架、磺酸基(水溶性)及末端胺基(-NH₂),用于与SPDP偶联。

SPDP(N-Succinimidyl 3-(2-pyridyldithio)propionate):

结构:

NHS酯端:与CY5.5的胺基反应,形成稳定酰胺键。

吡啶二硫基团:通过硫醇交换反应与含巯基(-SH)分子偶联。

作用:作为双功能交联剂,桥接荧光染料与目标分子(如抗体、多肽)。

整体结构:

CY5.5(荧光核心) → SPDP(交联臂) → 吡啶二硫基团(反应位点)

(示意图:CY5.5的胺基与SPDP的NHS酯反应,暴露吡啶二硫基团用于后续偶联)

2. 合成方法

步骤1:CY5.5与SPDP的偶联

反应条件:

缓冲液:PBS(pH 8.0-8.5,含10% DMSO助溶)。

摩尔比:CY5.5 : SPDP = 1 : 5(过量SPDP确保完全反应)。

温度:室温避光反应2小时。

纯化:凝胶过滤柱(如Sephadex G-25)去除未反应SPDP。

步骤2:与硫醇分子偶联

反应条件:

缓冲液:PBS(pH 7.4,含1 mM EDTA防氧化)。

摩尔比:CY5.5-SPDP : 硫醇分子 = 1 : 2(过量硫醇确保完全反应)。

温度:4℃过夜反应(减少二硫键交换副反应)。

纯化:超滤离心(截留分子量3 kDa)去除未反应分子。

表征方法:

UV-Vis吸收光谱:验证CY5.5的特征吸收峰(~675 nm)。

荧光光谱:确认发射波长(~690-720 nm)及量子产率。

MS:分子量增加SPDP片段(C₁₁H₁₂N₂O₄S₂,分子量300.35 Da)。

产地:西安

状态:固体/粉末/溶液

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh


关于我们:

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CY5.5-SPDP的物质组成与结构

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