CY5-枸杞多糖,荧光染料CY5标记枸杞多糖的简单合成步骤
CY5-枸杞多糖,荧光染料CY5标记枸杞多糖
名称:CY5-枸杞多糖,荧光染料CY5标记枸杞多糖
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
CY5 - 枸杞多糖合成方法
材料准备:提取并纯化的枸杞多糖、CY5 - NHS 酯、0.1 M 的 MES 缓冲液(pH 6.0 - 6.5)、磁力搅拌器、超滤离心管。
反应过程:首先将枸杞多糖溶解在 MES 缓冲液中,配制成浓度为 1 - 5 mg/mL 的溶液。取适量 CY5 - NHS 酯溶解于无水 DMSO,配成 5 - 10 mM 的溶液。在磁力搅拌下,将 CY5 - NHS 酯的 DMSO 溶液缓慢滴加到枸杞多糖溶液中,CY5 - NHS 酯与枸杞多糖中羟基等活性基团反应,二者摩尔比可控制在 5 - 10:1。由于枸杞多糖结构复杂,反应活性位点较多,适当增加染料比例有助于提高标记效率。在室温下避光反应 4 - 6 小时,反应过程中持续搅拌保证反应均匀。
产物分离:反应结束后,将混合液转移至超滤离心管中,以 3000 - 5000 rpm 的转速离心 10 - 15 分钟,去除未反应的小分子杂质。然后用 MES 缓冲液反复洗涤超滤离心管中的截留物,再次离心,重复 3 - 4 次。后将超滤离心管中的产物用适量水溶解,通过冷冻干燥得到 CY5 - 枸杞多糖的固体粉末。采用红外光谱(IR)、核磁共振(NMR)等方法对产物结构进行确认,用分光光度计测定其荧光强度以评估标记效果。
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