技术前沿

Cy7-Protein A,CAS1628790-40-8,菁染料Cy7标记蛋白的合成方法

2025-04-08 分享

Cy7-Protein A,CAS1628790-40-8,菁染料Cy7标记蛋白

Cy7 - Protein A,CAS1628790 - 40 - 8,菁染料 Cy7 标记蛋白合成方法

选择标记位点:Protein A 含有多个可修饰位点,如赖氨酸残基的氨基、半胱氨酸残基的巯基等。若以氨基为标记位点,选择 Cy7 - NHS 酯作为标记试剂;若以巯基为标记位点,选用 Cy7 - 马来酰亚胺(Cy7 - MAL)作为标记试剂,这里以氨基位点为例。

缓冲液置换:将 Protein A 溶解在合适缓冲液(如 pH 7.4 的磷酸盐缓冲液)中,通过透析或凝胶过滤色谱法,将缓冲液置换为标记反应适宜的缓冲液,去除可能影响反应的杂质及原有缓冲液中的干扰成分。

标记反应:将 Cy7 - NHS 酯溶解于少量二甲基亚砜(DMSO)中,缓慢加入到 Protein A 溶液中,室温、避光搅拌反应 4 - 6 小时。反应过程中,Cy7 - NHS 酯的 NHS 基团与 Protein A 中赖氨酸残基的氨基反应,实现 Cy7 对 Protein A 的标记。

产物纯化:反应结束后,采用尺寸排阻色谱(如 Sephadex G - 50 柱)对反应混合液进行分离,以合适缓冲液为流动相,收集含有标记蛋白 Cy7 - Protein A 的洗脱液,去除未反应的 Cy7 - NHS 酯及其他杂质。通过十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS - PAGE)检测标记蛋白纯度与分子量变化,荧光分光光度计测定标记蛋白荧光强度,评估标记效率与蛋白活性,确认 Cy7 成功标记 Protein A 。

名称:Cy7-Protein A,CAS1628790-40-8,菁染料Cy7标记蛋白

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

Cy7-Protein A,CAS1628790-40-8,菁染料Cy7标记蛋白

推荐产品:

Sulfo-Cyanine7-carboxylicacid

FITC-ConA

荧光素偶联刀豆蛋白A

异硫氰酸荧光素-刀豆蛋白A

荧光素标记菊粉(FITC-Inulin)

CY5-Inulin

Inulin-FITC菊粉荧光素标记



仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.03.04