Cy7-Protein A，CAS1628790-40-8，菁染料Cy7标记蛋白的合成方法

Cy7-Protein A，CAS1628790-40-8，菁染料Cy7标记蛋白

Cy7 - Protein A，CAS1628790 - 40 - 8，菁染料 Cy7 标记蛋白合成方法

选择标记位点：Protein A 含有多个可修饰位点，如赖氨酸残基的氨基、半胱氨酸残基的巯基等。若以氨基为标记位点，选择 Cy7 - NHS 酯作为标记试剂；若以巯基为标记位点，选用 Cy7 - 马来酰亚胺（Cy7 - MAL）作为标记试剂，这里以氨基位点为例。

缓冲液置换：将 Protein A 溶解在合适缓冲液（如 pH 7.4 的磷酸盐缓冲液）中，通过透析或凝胶过滤色谱法，将缓冲液置换为标记反应适宜的缓冲液，去除可能影响反应的杂质及原有缓冲液中的干扰成分。

标记反应：将 Cy7 - NHS 酯溶解于少量二甲基亚砜（DMSO）中，缓慢加入到 Protein A 溶液中，室温、避光搅拌反应 4 - 6 小时。反应过程中，Cy7 - NHS 酯的 NHS 基团与 Protein A 中赖氨酸残基的氨基反应，实现 Cy7 对 Protein A 的标记。

产物纯化：反应结束后，采用尺寸排阻色谱（如 Sephadex G - 50 柱）对反应混合液进行分离，以合适缓冲液为流动相，收集含有标记蛋白 Cy7 - Protein A 的洗脱液，去除未反应的 Cy7 - NHS 酯及其他杂质。通过十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS - PAGE）检测标记蛋白纯度与分子量变化，荧光分光光度计测定标记蛋白荧光强度，评估标记效率与蛋白活性，确认 Cy7 成功标记 Protein A 。

名称：Cy7-Protein A，CAS1628790-40-8，菁染料Cy7标记蛋白

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.03.04