CY7标记脂多糖,CY7-LPS应用于细胞成像
CY7标记脂多糖,CY7-LPS细胞成像
名称:CY7标记脂多糖,CY7-LPS细胞成像
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
脂多糖预处理:脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁成分,含有多个可修饰位点。将 LPS 溶解在磷酸盐缓冲溶液(PBS,pH 7.4)中,通过透析或超滤等方法去除杂质和小分子污染物,获得纯净的 LPS 溶液。
CY7 - NHS 酯准备:将 CY7 - NHS 酯溶解于少量二甲基亚砜(DMSO)中,制成浓度合适的溶液,以保证其反应活性。
标记反应:在室温、避光条件下,将 CY7 - NHS 酯的 DMSO 溶液缓慢滴加到 LPS 溶液中,边滴加边搅拌。LPS 分子中的氨基等活性基团可与 CY7 - NHS 酯的 N - 羟基琥珀酰亚胺基团发生反应,实现 CY7 对 LPS 的标记。反应持续 8 - 12 小时,可通过荧光分光光度计检测反应体系在 CY7 激发波长下的荧光强度变化来监测反应进程。
产物纯化:反应结束后,将反应混合液装入透析袋(截留分子量根据 LPS 和 CY7 - NHS 酯的分子量选择),在大量 PBS 缓冲液中透析 1 - 2 天,定时更换透析液,去除未反应的 CY7 - NHS 酯、DMSO 及其他小分子杂质。透析结束后,收集透析袋内的溶液,即得到 CY7 标记的脂多糖 CY7 - LPS。通过高效液相色谱(HPLC)分析产物纯度,利用荧光显微镜观察 CY7 - LPS 在细胞成像中的荧光效果,评估标记效果和 LPS 的生物学活性。
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