什么是生物素化?生物素化的蛋白
2024-11-05
分享
什么是生物素化?
生物素化 是将生物素标记为蛋白,抗体,肽或其他生物分子等目标分子 (图 1)。生物素化蛋白通常保留生物活性,因为生物素基团相对较小。生物素 (图 2) 是一种天然维生素,可高亲和力与亲和素和链霉素亲和素蛋白结合。生物素与亲和素间的结合非常迅速,而且一旦形成便不受极端pH值、温度、有机溶剂和其它变性剂的影响。了解更多亲和素-生物素类检测方法
生物素标记试剂,可靶向生物分子上的特定官能团或残基,如伯胺,巯基,羧基或碳水化合物。生物素化蛋白可通过酶联免疫吸附检测 (ELISA) , Western 印迹,免疫组织化学技术 (IHC) ,免疫沉淀 (IP) 或流式细胞分析应用捕获或检测。
图 1.生物素化的蛋白。如果抽拉成比例,代表蛋白的椭圆形会比结构大很多倍,并且可能包含多个氨基。请注意, NHS 是反应中的一个离去基团 (副产物)。在脱盐步骤中,去除离去基团和任何未反应的生物素试剂。
图2.生物素结构。生物素也称为 B- 维生素 B7 (曾用名维生素 H 和辅酶 R) 是水溶性的。分子由一个与四氢噻吩环连接的 ureido 环组成。作为羧基化酶的一种辅酶,生物素是合成脂肪酸,异亮氨酸和缬氨酸所必需的。生物素也参与胶质生成。