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CY5-ConA,CY5-刀豆蛋白A,CY5-Concanavalin A,合成路线

2025-05-07 分享

CY5-ConA,CY5-刀豆蛋白A,CY5-Concanavalin A,合成路线

CY5-ConA 是将 Cy5 荧光染料与刀豆蛋白 A(Concanavalin A,ConA)偶联的产物。刀豆蛋白 A 是一种从刀豆中提取的凝集素,能特异性结合糖蛋白和多糖上的 α - 甘露糖、α - 葡萄糖残基,在细胞生物学和免疫学研究中广泛应用。其合成路线如下:

步,活化 Cy5 荧光染料。将 Cy5-COOH 与 NHS、EDC 在无水 DMSO 中反应,制备 Cy5-NHS 活性酯,反应条件同 CY5-Calycosin 的制备,得到活化的 Cy5 染料 。

第二步,偶联反应。将 ConA 溶解于 pH 7.2 - 7.4 的 PBS 缓冲液中,缓慢加入 Cy5-NHS 溶液,ConA 分子表面的氨基作为亲核试剂与 Cy5-NHS 的活性酯基发生反应,形成酰胺键。反应体系中,ConA 与 Cy5-NHS 的摩尔比控制在 1:5 - 1:10,室温避光搅拌反应 2 - 4 小时 。

第三步,纯化。反应结束后,通过透析或凝胶过滤色谱法去除未反应的 Cy5-NHS 和其他小分子杂质。透析时,将反应混合物装入透析袋,置于大量 PBS 缓冲液中,4℃透析过夜;凝胶过滤色谱可选用 Sephadex G - 50 或 Sephacryl S - 100 柱,收集含有 CY5-ConA 的洗脱峰,得到纯化产物 。

后,对 CY5-ConA 进行表征。利用紫外 - 可见分光光度法、荧光光谱法检测其吸收和发射特性,通过 SDS - PAGE 分析蛋白质纯度,质谱测定分子量,验证合成产物的结构和活性,确保其适用于细胞表面糖蛋白检测、细胞凝集实验等生物医学研究 。

名称:CY5-ConA,CY5-刀豆蛋白A,CY5-Concanavalin A

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

CY5-Concanavalin A

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