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巨噬细胞清除脂质体用于C57BL/6雄性小鼠

2025-05-09 分享

动物模型:C57BL/6雄性小鼠(8 ~ 10周龄,23 ~ 25 g);C57BL/6背景Cx3cr1GFP/+小鼠(雄性,8 ~ 10周龄,23-25 g)

巨噬细胞清除脂质体:

Clophosome®-A - Clodronate Liposomes (Anionic)Cat#F70101C-A)

DiI Fluorescent Control Liposomes for Clophosome® -A (Anionic) (2mL) (Cat#F70101F-A-2)

巨噬细胞清除方法

Cx3cr1GFP/+小鼠和C57BL/6小鼠按先前报道的方法,将1 μLLiposomes 1 μL的对照Dil-Lip注射到左纹状体(距囟门前方0.8毫米,外侧2.0毫米,深度为3.0毫米)

巨噬细胞清除结果:

A.

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注射Clodronate liposomes24小时开始在脑实质中消耗小胶质细胞,注射1 μL Dil-Lip后第1天的一系列脑切片(脂质体用红色荧光染料Dil标记)进入纹状体(图A第一排)或脑侧室(图A第二排)

代表性图像显示,纹状体注射 Dil-LipClodronate liposomes后不同时间点Cx3cr1-GFP+小胶质细胞(绿色)的耗竭。(图A第三、四排)显示放大后的小胶质细胞图像。

B.

注射1 μL Clodronate liposomes后纹状体Cx3cr1-GFP+细胞的量化数据(图B)。

C.

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Clodronate liposomes注射后的第147天,用流式细胞术分析Cx3cr1-GFP+小胶质细胞。图中显示了代表性的点图,并显示了纹状体细胞群中Cx3cr1-GFP+的百分比。红色:Cx3cr1-GFP−细胞群;绿色:Cx3cr1-GFP+细胞群(图C)。

 

D.

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图表显示注射Clodronate liposomes后纹状体和皮层中剩余Cx3cr1-GFP+种群的百分比(图D)。

参考文献:Han X, Li Q, Lan X, El-Mufti L, Ren H, Wang J. Microglial Depletion with Clodronate Liposomes Increases Proinflammatory Cytokine Levels, Induces Astrocyte Activation, and Damages Blood Vessel Integrity. Mol Neurobiol. 2019;56(9):6184-6196. doi:10.1007/s12035-019-1502-9