叠氮PEG氨基 , N3-PEG-NH2的生物偶联与分子标记
产品名称:叠氮PEG氨基 , N3-PEG-NH2
一、应用场景与案例
生物偶联与分子标记
抗体/蛋白修饰:通过氨基与羧基化荧光染料、药物或纳米颗粒偶联,再利用叠氮基团与炔基化靶标(如细胞膜炔烃)点击反应,实现双功能化修饰。
核酸适配体标记:氨基与核酸5'端羧基反应,叠氮基团后续用于生物正交标记(如CuAAC偶联荧光探针)。
药物递送系统
纳米颗粒表面修饰:将N₃-PEG-NH₂接枝到脂质体或聚合物纳米粒表面,氨基可负载药物,叠氮基团用于靶向配体(如叶酸-炔烃)的点击偶联。
前药设计:通过PEG链连接药物与靶向基团,氨基与酸敏感键(如腙键)结合,实现pH响应性释放。
材料科学与组织工程
水凝胶合成:叠氮基团与炔烃化单体(如丙炔酸)点击交联,氨基可引入生物活性分子(如RGD肽),构建智能水凝胶。
生物材料涂层:在医疗器械表面形成抗污涂层,氨基可共价结合肝素等抗凝物质,叠氮基团用于后续功能化。
二、实验操作指南
点击化学反应(CuAAC)
反应条件:叠氮基团(N₃-PEG-NH₂)与炔基化分子(如Alkyne-PEG-COOH)摩尔比1:1,CuSO₄(5 mM)、抗坏血酸钠(10 mM),PBS缓冲液(pH 7.4),37℃反应1-2小时。
纯化方法:超滤离心(MWCO 10 kDa)去除催化剂和副产物,或透析(MWCO 3.5 kDa)48小时。
氨基与羧基反应
活化步骤:羧基化分子(如COOH-PEG-COOH)与EDC/NHS(摩尔比1:1:1)在MES缓冲液(pH 6.0)中活化30分钟,再与N₃-PEG-NH₂(1:1.2)反应过夜。
表征手段:UV-Vis检测叠氮残留(λ=260 nm需校正),HPLC或SDS-PAGE确认偶联效率,DLS测定粒径变化。
常见问题与解决方案
CuAAC反应效率低:检查CuSO₄和抗坏血酸钠浓度是否足够,或改用无铜点击化学(如SPAAC,DBCO-N₃反应)。
氨基反应副产物:控制pH(7.0-8.0),避免氨基与羧基自缩合,可添加过量羧基分子提高产率。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
关于我们:
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