二苯并环辛烯PEG二硬脂酰磷脂酰乙酰胺的实验操作指南

产品名称：二苯并环辛烯PEG二硬脂酰磷脂酰乙酰胺 , DBCO-PEG-DSPE

实验操作指南

脂质体制备与膜插入

薄膜水化法：将DBCO-PEG-DSPE、磷脂（如DPPC、Chol）按比例（如5:90:5）溶于氯仿，旋转蒸发成膜，加入PBS水化，超声或挤压通过100 nm滤膜。

后插入法：将预制脂质体与DBCO-PEG-DSPE（DMSO溶液）混合，37℃孵育30分钟，离心去除游离分子。

点击化学反应（SPAAC）

反应条件：叠氮化分子（如N₃-PEG-Folate）与DBCO-PEG-DSPE修饰的脂质体（1:10摩尔比），PBS缓冲液（pH 7.4），37℃反应1小时。

纯化方法：超速离心（100,000 g，30分钟）或凝胶过滤色谱（Sepharose CL-4B）分离未反应分子。

表征手段

粒径与Zeta电位：DLS检测脂质体水合粒径（通常100-200 nm）和表面电荷（约-30 mV）。

偶联效率：荧光光谱定量（如Cy5-N₃标记后，激发波长649 nm，发射波长670 nm），或HPLC分析游离叠氮分子残留。

常见问题与解决方案

脂质体聚集：PEG链过短（<2 kDa）或插入比例过高（>10 mol%）导致，建议优化PEG分子量和掺入比例。

点击反应效率低：检查pH值是否偏离中性（SPAAC在pH 6-8效率较高），或改用更活泼的叠氮化分子（如DBCO-Sulfo-N₃）。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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