CY5-Dextran,近红外红色荧光葡聚糖探针可用于活体成像
CY5-Dextran,近红外红色荧光葡聚糖探针可用于活体成像专用
一、基本信息
中文名:花菁染料 CY5 标记葡聚糖
英文名:CY5-Dextran
别称:CY5 标记葡聚糖
二、荧光特性
激发与发射波长:CY5-Dextran 的激发波长通常在 640 - 650nm 左右,发射波长大约在 660 - 670nm,发出明亮的近红外荧光。近红外荧光在生物组织中具有较好的穿透性,可减少生物组织对荧光的吸收和散射,非常适合用于深层组织成像,能够降低背景荧光干扰,提高成像的信噪比。
荧光稳定性:CY5 染料在合适的储存条件下(如避光、低温)具有一定的荧光稳定性,但在光照、氧化以及某些化学物质存在的环境下,其荧光强度会逐渐降低,发生光漂白现象。在实验过程中,需要采取相应的保护措施,如使用避光容器、添加*氧化剂等,以延长其荧光寿命。
三、物理化学属性
外观:一般为深蓝色或蓝紫色的粉末或溶液,外观颜色会受到分子量大小、CY5 标记程度以及溶液浓度的影响。
溶解性:具有良好的水溶性,能迅速溶解在水中形成均匀的溶液。此外,它也可溶于一些极性有机溶剂,如二甲基亚砜(DMSO)等,但在非极性有机溶剂中的溶解性较差。
分子量范围:葡聚糖本身存在多种不同的分子量规格,常见的 CY5-Dextran 分子量范围可从几千道尔顿到几百万道尔顿不等。不同分子量的 CY5-Dextran 在溶液中的黏度、扩散速度等物理性质会有所不同。小分子量的 CY5-Dextran 扩散速度快,更适合用于研究细胞内的快速动态过程;大分子量的 CY5-Dextran 则可能在体内具有较长的循环时间,适用于研究药物递送系统在体内的分布和代谢。
四、应用领域
(一)生物成像
活体成像
肿瘤成像:CY5-Dextran 可用于标记肿瘤靶向药物载体或纳米颗粒。将其注射到实验动物体内后,通过近红外荧光成像系统可以实时监测药物载体在体内的分布情况,观察其是否能够特异性地富集在肿瘤部位。例如,在研究肿瘤的血管生成和转移过程中,CY5-Dextran 标记的示踪剂可以帮助研究人员了解肿瘤组织与周围正常组织的血管通透性差异,以及药物载体在肿瘤微环境中的行为。
神经系统成像:由于近红外荧光具有较好的组织穿透性,CY5-Dextran 可用于研究神经系统疾病。例如,将 CY5-Dextran 注射到脑脊液中,可以观察其在脑组织中的扩散和分布情况,研究脑脊液的循环动力学以及药物在脑内的递送途径。这对于开发治疗神经系统疾病的药物和方法具有重要意义。
细胞成像
细胞内吞研究:CY5-Dextran 可作为细胞内吞的示踪剂。将 CY5-Dextran 加入到细胞培养基中,细胞会通过内吞作用将其摄取到细胞内。通过荧光显微镜可以实时观察 CY5-Dextran 在细胞内的分布和动态变化,研究细胞内吞的机制和调控因素。例如,研究不同细胞类型对 CY5-Dextran 的摄取能力差异,以及药物或信号分子对细胞内吞过程的影响。
细胞间通讯研究:在细胞共培养体系中,利用 CY5-Dextran 标记一种细胞群体,可以观察其与另一种未标记细胞群体之间的物质交换和信号传递。通过检测 CY5-Dextran 在不同细胞之间的转移情况,可以研究细胞间的通讯机制,如间隙连接通讯、外泌体介导的通讯等。
(二)血管研究
血管灌注与通透性研究
血管灌注评估:CY5-Dextran 常用作血管灌注的示踪剂,用于评估器官或组织的血管灌注情况。将其注射到动物体内后,通过检测组织中的荧光强度可以了解血液在不同器官或组织中的分布和灌注量。例如,在研究心肌缺血再灌注损伤时,CY5-Dextran 可以帮助研究人员评估心肌组织的灌注恢复情况,判断治疗效果。
血管通透性改变研究:在炎症、肿瘤等疾病状态下,血管通透性会发生改变。CY5-Dextran 可以从血管中渗出到周围组织中,通过检测组织中的荧光强度可以评估血管通透性的变化程度。例如,在研究炎症性疾病时,CY5-Dextran 可以标记炎症部位的血管渗漏情况,为炎症的诊断和治疗提供依据。
微循环研究
微血管网络观察:由于 CY5-Dextran 的近红外荧光特性,它可以在不干扰微循环的情况下对微血管网络进行成像。通过高分辨率的荧光显微镜,可以清晰地观察到微血管的形态、分支和血流情况。这对于研究微循环的生理功能和病理改变具有重要意义,例如研究糖尿病视网膜病变中微血管的异常变化。
血流动力学研究:结合图像分析技术,CY5-Dextran 标记的示踪剂可以用于研究微循环中的血流动力学参数,如血流速度、血流量等。通过连续拍摄荧光图像并分析像素强度的变化,可以计算出微血管中的血流速度,为研究微循环的调节机制提供数据支持。
(三)药物递送系统研究
载体标记与追踪
体内分布研究:在构建基于葡聚糖的药物递送系统时,CY5-Dextran 可作为药物载体的标记物。通过检测荧光信号,可以实时监测药物载体在体内的分布情况,了解其在不同器官和组织中的富集程度。例如,研究纳米颗粒药物载体在体内的靶向性,观察其是否能够准确地到达肿瘤部位,为优化药物递送系统的设计提供依据。
代谢过程研究:CY5-Dextran 标记的药物载体还可以用于研究其在体内的代谢过程。通过检测荧光信号的变化,可以了解药物载体在体内的降解、清除情况,以及药物从载体中的释放行为。这对于评估药物递送系统的安全性和有效性具有重要意义。
药物释放监测
体外释放研究:将药物与 CY5-Dextran 共同负载到药物载体中,在体外模拟不同的生理环境(如不同的 pH 值、温度、酶浓度等),利用荧光强度的变化来研究药物的释放行为。例如,通过检测释放介质中 CY5-Dextran 标记的药物的荧光强度,可以绘制药物释放曲线,了解药物的释放速率和释放机制。
体内释放研究:在体内实验中,结合近红外荧光成像技术,可以实时监测药物从载体中的释放情况。通过观察荧光信号在体内的分布和强度变化,可以研究药物在不同组织中的释放动力学,为开发具有控释功能的药物递送系统提供技术支持。
五、合成方法
化学偶联法
CY5 染料活化:
首先将 CY5 染料进行活化,使其具有反应活性。一般是在适当的条件下,CY5 染料上的活性基团(如羧基)与活化剂(如 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和碳二亚胺(EDC))反应,形成活化的中间体。例如,将 CY5 染料溶解在适当的有机溶剂中,加入 NHS 和 EDC,在室温下搅拌反应一段时间,使 CY5 染料的羧基活化。
与葡聚糖反应:
将活化的 CY5 染料溶液逐滴加入到葡聚糖溶液中,在适宜的温度和 pH 值条件下(如 37℃、pH 7.4)反应一定时间(如数小时),使 CY5 染料与葡聚糖形成共价键连接。反应过程中需要不断搅拌,以保证反应的均匀性。
纯化:
反应结束后,通过透析、离心等方法除去未反应的 CY5 染料和其他杂质,得到纯净的 CY5-Dextran。透析是常用的纯化方法,将反应液装入透析袋中,放入适当的缓冲液中进行透析,定期更换缓冲液,直到透析液中检测不到游离的 CY5 染料为止。
反应条件优化
温度:温度会影响反应的速率和产率。温度过高可能导致 CY5 染料分解或葡聚糖降解,温度过低则反应速度较慢。因此,需要选择合适的反应温度,一般在室温到 37℃之间进行优化。
pH 值:pH 值对反应的选择性和产率也有重要影响。不同的反应体系需要不同的 pH 值条件,通常在弱碱性条件下(pH 7 - 9)进行反应,以保证 CY5 染料和葡聚糖上的官能团能够充分反应。
反应时间:反应时间过短可能导致反应不完全,标记效率低;反应时间过长则可能增加副反应的发生几率。因此,需要通过实验确定*佳的反应时间。
CY5 染料与葡聚糖的比例:CY5 染料与葡聚糖的比例会影响标记程度和产物的性能。过高的 CY5 染料比例可能导致葡聚糖分子上标记过多的染料,影响其溶解性和生物相容性;过低的比例则可能导致标记效率低。因此,需要优化 CY5 染料与葡聚糖的比例,以获得*佳的标记效果。
六、相关文献
《CY5-Dextran 在肿瘤活体成像中的应用研究》:
该文献详细介绍了 CY5-Dextran 作为肿瘤靶向示踪剂在活体动物肿瘤成像中的应用方法和结果。通过实验证明,CY5-Dextran 能够清晰地显示肿瘤的位置和大小,并且可以实时监测肿瘤的生长和转移情况,为肿瘤的早期诊断和治疗提供了有力的工具。
《基于 CY5-Dextran 标记的药物递送系统体内外评价》:
文献报道了利用 CY5-Dextran 标记药物载体,研究其在体内的分布、靶向性和药物释放行为的研究成果。通过体内外实验相结合,证明了 CY5-Dextran 在药物递送系统评价中的可行性和有效性,为开发新型药物递送系统提供了重要的参考。
《CY5-Dextran 在血管通透性研究中的应用进展》:
此文献综述了 CY5-Dextran 在评估不同疾病状态下血管通透性变化方面的研究进展。介绍了实验方法、结果分析以及临床应用前景,为相关领域的研究人员提供了全面的参考,有助于深入了解血管通透性改变的机制和治疗方