HSA-Biotin,人血清白蛋白-生物素的反应步骤
HSA-Biotin,人血清白蛋白-生物素的反应步骤
HSA-Biotin的合成步骤主要包括活化、偶联与纯化三个环节,目标是将生物素共价连接到HSA分子上,构建具有特异结合能力的功能蛋白。
步骤如下:
活化生物素:使用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)与生物素反应,制得Biotin-NHS酯。该酯在干燥条件下保存,具有对伯胺高反应性的特点。
蛋白偶联:将人血清白蛋白(HSA)溶解于pH 7.4–8.0的PBS或碳酸盐缓冲液中,缓慢加入Biotin-NHS(通常以5:1或更高摩尔比),在室温或4℃反应1–2小时,期间避免光照。
终止与纯化:反应完成后,可用甘氨酸或Tris缓冲液封闭多余的活性酯;之后通过透析(截留分子量10 kDa以上)或凝胶层析去除未反应的Biotin-NHS及副产物。
表征:可采用HABA/Avidin比色法、质谱或SDS-PAGE检测偶联程度与蛋白完整性。
HSA-Biotin产品保持蛋白构象的同时引入生物素标记,可用于免疫标记、荧光成像、亲和捕获等多种平台,特别适用于构建可控组装体系和多功能纳米探针。
产品名称:HSA-Biotin,人血清白蛋白-生物素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
良林生物供应各种荧光染料,包括CY系列、FITC、Rhodamine、Bodipy系列染料、Coumairn 染料、Dansyl染料、FAM/5-TAMRA、NBD、ICG及IR系列、ATTO系列染料、AMCA、Perylene、碘化物、DIR/DIL/DIO/DID/DAPI细胞膜染料等等,提供各种荧光(CY系列、FITC、香豆素、罗丹明等)荧光染料标记的定制服务
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc