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AF647小麦胚芽凝集素(WGA),AF647 Wheat Germ Agglutinin的合成路线

2025-07-11 分享

AF647小麦胚芽凝集素(WGA),AF647 Wheat Germ Agglutinin的合成路线

AF647-Wheat Germ Agglutinin(AF647-WGA)是一种结合近红外荧光染料Alexa Fluor 647与小麦胚芽凝集素(WGA)的标记探针,常用于细胞膜糖链标记和成像。WGA是一种植物源凝集素,特异性结合N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和唾液酸结构,广泛存在于哺乳动物细胞膜糖蛋白上。

合成路线如下:

染料选择:Alexa Fluor 647具有激发/发射波长为650/668 nm,荧光强度高、光稳定性强,适合多重标记和深层组织成像。

蛋白修饰位置:WGA中多个赖氨酸残基提供反应位点,用于与NHS酯类染料进行共价结合。

活化反应:选用Alexa Fluor 647 NHS ester,能在pH 7.5–8.5缓冲液中与WGA蛋白的ε-氨基反应,形成稳定的酰胺键。

控制标记程度:通过调整染料与WGA的摩尔比控制标记密度,避免荧光淬灭或蛋白功能受损。

纯化步骤:反应完成后,使用凝胶过滤柱(如Sephadex G-25)分离游离染料,收集标记后的AF647-WGA产物。

质量检测:通过紫外-可见分光光度法确定标记度,同时可使用PAGE确认蛋白完整性。

产品名称:AF647小麦胚芽凝集素(WGA),AF647 Wheat Germ Agglutinin

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

AF647 Wheat Germ Agglutinin

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