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endo-BCN-PEG2-amine,内型双环[6.1.0]壬-4-炔-二聚乙二醇-氨基的合成方法

2025-07-17 分享

产品名称:endo-BCN-PEG2-amine,内型双环[6.1.0]壬-4-炔-二聚乙二醇-氨基的合成方法

合成方法

endo-BCN-PEG2-amine 的制备

步骤:

endo-BCN-PEG2-COOH 合成:

将 endo-BCN-OH(内型双环辛炔)与 PEG2-COOH(二聚乙二醇羧酸)在EDC/NHS催化下反应,生成 endo-BCN-PEG2-COOH。

氨基引入:

将 endo-BCN-PEG2-COOH 与 氨水(NH₃·H₂O) 在pH 9.0的碳酸盐缓冲液中反应,生成 endo-BCN-PEG2-amine。

纯化:

通过高效液相色谱(HPLC)或半制备型凝胶过滤层析(如Sephadex G-10)去除未反应原料。

生物偶联物的制备

羧酸/活性酯标记:

将 endo-BCN-PEG2-amine(1 eq)溶解于 DMSO,缓慢滴加至含 抗体(如利妥昔单抗,2 mg/mL) 的 PBS 缓冲液中,室温搅拌1小时。

通过 超滤(10 kDa MWCO) 去除未反应试剂,并用 BCA 法测定蛋白浓度。

SPAAC功能化:

将 叠氮修饰的荧光染料(如 Cy5-N₃,5 eq) 加入至 抗体-PEG2-endo-BCN 溶液中,室温孵育2小时。

通过 尺寸排阻色谱(SEC) 纯化偶联产物,并用 SDS-PAGE 验证标记效率(通常 >90%)。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

endo-BCN-PEG2-amine,内型双环[6.1.0]壬-4-炔-二聚乙二醇-氨基

关于我们:

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