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FITC标记雷公藤红素的标记方法

2025-07-21 分享

产品名称:FITC标记雷公藤红素的标记方法

一、标记方法

1. 直接标记法(需化学修饰)

步骤:

引入氨基:通过化学合成在雷公藤红素分子中引入氨基(如通过酯化、醚化或酰胺化反应)。

FITC偶联:将修饰后的雷公藤红素与FITC在缓冲液(如pH 9.0的碳酸盐缓冲液)中避光反应,形成FITC-雷公藤红素共价复合物。

纯化:通过色谱法(如HPLC或凝胶过滤)分离未反应的FITC和副产物,获得纯品。

挑战:

雷公藤红素的化学修饰可能影响其生物活性。

反应条件需严格控制以避免过度修饰或降解。

2. 间接标记法(通过载体蛋白)

适用场景:若直接修饰困难,可通过载体蛋白(如BSA、OVA)实现间接标记。

步骤:

将雷公藤红素与载体蛋白偶联,形成雷公藤红素-蛋白复合物。

用FITC标记该复合物,获得FITC-蛋白-雷公藤红素标记物。

优势:保留雷公藤红素活性,但可能增加标记物分子量,影响体内分布。

二、关键技术参数

标记效率:通过荧光光谱仪测定FITC与雷公藤红素的摩尔比,优化反应条件(如pH、温度、反应时间)。

纯度控制:HPLC分析标记物纯度,确保无游离FITC或未修饰雷公藤红素残留。

稳定性测试:评估标记物在不同条件(如温度、pH、光照)下的稳定性,确保实验可靠性。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

FITC标记雷公藤红素

关于我们:

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