CY5-NADH,花菁染料CY5标记还原型辅酶Ⅰ的合成方式
2025-07-23
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CY5-NADH(花菁染料CY5标记还原型辅酶Ⅰ)
中文名称:花菁染料CY5标记还原型辅酶Ⅰ(CY5-NADH)
英文名称:CY5-labeled Nicotinamide Adenine Dinucleotide (Reduced Form, NADH)
基本结构
NADH是参与细胞代谢、能量转化和氧化还原反应的关键辅酶,其在呼吸链和多种脱氢酶反应中起到电子供体的作用。CY5为一种远红外花菁染料,具有较好的组织穿透性及低背景荧光。
合成方式
NADH活性修饰:在其腺苷或烟酰胺环上引入可反应基团(如氨基或叠氮基)。
CY5共价偶联:使用活化酯或NHS-CY5与NADH偶联,确保标记位置不破坏其生物活性。
纯化与分析:通过透析、HPLC分离,确保标记纯度。
荧光参数
激发波长:649 nm
发射波长:670 nm
优点:生物组织中自发荧光干扰低
应用方向
代谢荧光成像:实时可视化NADH的摄取与代谢;
酶活性分析:监测NADH参与的脱氢反应;
癌细胞代谢研究:用于测定细胞的有氧/厌氧代谢状态;
高通量药物筛选:通过荧光信号判断代谢酶活性变化。
特点总结
光谱红移,适合活体深层成像;
能在保持NADH活性的同时提供动态追踪能力;
有助于氧化还原体系可视化研究。