CY5.5标记胶原蛋白的反应活性
CY5.5标记胶原蛋白的反应活性
胶原蛋白是和多种生物体内丰富的结构蛋白,具有多种反应活性官能团,应用于生物医学材料。通过CY5.5荧光染料标记胶原蛋白,可实现其荧光追踪和功能研究。了解CY5.5与胶原蛋白的反应活性对于制备高效、稳定的标记物至关重要。
1. 胶原蛋白的化学结构与反应官能团
胶原蛋白为三股螺旋结构,含有大量的氨基酸残基,其中赖氨酸(ε-氨基)和羟脯氨酸、羟赖氨酸是主要的反应位点。
这些氨基和羟基为CY5.5-NHS酯的亲核攻击提供了丰富的靶点。
胶原蛋白的羧基(来自天冬氨酸和谷氨酸残基)在适当条件下也可参与化学修饰。
2. CY5.5的活性基团及反应机理
CY5.5通常以NHS酯活性形式存在,能够与蛋白的一级氨基形成稳定的酰胺键。
反应属于亲核加成-消除机理,氨基的孤对电子攻击活性酯碳酰中心,生成酰胺键并释放NHS。
3. 反应条件及活性控制
pH控制在7.4至8.5范围内,兼顾氨基的活性和蛋白质的稳定性。
反应温度一般为室温至37℃,避免高温导致蛋白变性。
反应时间从数小时到过夜不等,以实现充分标记。
4. 反应活性的特性
胶原蛋白中赖氨酸暴露度和空间构象影响标记效率。
标记密度需平衡,过高会影响蛋白质的结构和生物功能。
染料分子较大,偶联可能引发局部构象改变,需优化条件减少负面影响。
5. 标记后性质和应用
标记后的胶原蛋白保留了胶原的生物活性和细胞结合能力。
荧光信号使其在细胞外基质研究、组织工程支架监测及生物成像中应用。
可用于观察胶原蛋白在细胞迁移、组织重塑等过程中的动态变化。
6. 纯化与表征
通过透析、凝胶过滤色谱去除游离染料。
紫外-可见吸收和荧光光谱分析标记效果。
产品名称:CY5.5标记胶原蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc