Cy5.5-Recombinant Protein A，CY5.5标记重组蛋白A的反应机理

Cy5.5-Recombinant Protein A，CY5.5标记重组蛋白A的反应机理

重组蛋白A（Recombinant Protein A）是一种来源于金黄色葡萄球菌的蛋白，用于抗体的纯化和免疫检测。通过Cy5.5标记重组蛋白A，不仅能够赋予其荧光特性，还能实现其在免疫分析和生物成像中的应用。以下为Cy5.5标记重组蛋白A的反应原理及机制详解。

重组蛋白A的结构特点

蛋白A分子中富含赖氨酸残基，其ε-氨基为主要的化学修饰位点。蛋白A对IgG Fc段具有高亲和力，标记后依然保持结合能力。

Cy5.5染料的活性基团

Cy5.5通常以NHS酯（N-羟基琥珀酰亚胺酯）形式存在，能够与蛋白的氨基形成稳定的酰胺键，实现共价连接。

反应机理

在缓冲液（pH 7.2-8.5）中，蛋白A的赖氨酸ε-氨基作为亲核试剂攻击Cy5.5-NHS酯上的羧基碳，释放NHS基团，形成酰胺键。

反应为亲核取代反应，属于共价修饰，具有高度特异性和稳定性。

反应速率受pH、温度及摩尔比影响。

反应步骤

蛋白预处理：调节蛋白溶液至适宜pH，去除干扰物质（如氨基缓冲液）。

混合反应：将Cy5.5-NHS酯溶于有机溶剂（如DMSO）后，缓慢加入蛋白溶液中，轻柔混合。

反应时间：通常为1-4小时，避免过度标记导致蛋白变性。

终止反应与纯化：通过透析、凝胶过滤等方法去除游离染料，获得纯净的Cy5.5标记蛋白A。

标记效果与功能保持

合理标记比例确保蛋白A保持良好亲和力和结构稳定性。

荧光强度取决于标记效率和染料数量，通常通过紫外吸收和荧光测定评估。

标记蛋白A可用于免疫检测，兼具结合功能与可视化能力。

产品名称：Cy5.5-Recombinant Protein A，CY5.5标记重组蛋白A

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc