TCO-PEG-NH2的操作要点：高效反应与稳定性的关键

产品名称：TCO-PEG-NH2的操作要点：高效反应与稳定性的关键

操作要点：高效反应与稳定性的关键

1. 合成与修饰控制

TCO 合成：

环辛烯通过光催化异构化生成反式环辛烯（TCO），通过 ¹H NMR 验证结构（δ=5.5-6.0 ppm, TCO 双键质子）。

PEG 连接：

TCO 通过酯键或酰胺键与 PEG 臂末端连接，反应条件为 DMF/PBS（pH 8.5），DIEA 催化，室温过夜。

NH₂ 修饰：

PEG 末端通过酰胺键连接氨基（如 NH₂-PEG-NHS），反应条件为室温反应 2-4 小时，NH₂ 与 PEG 的摩尔比为 1:1-1:5。

纯化：

硅胶柱层析（EtOAc/MeOH 梯度）去除未反应原料，确保产物纯度 >95%。

2. 生物正交反应操作

TCO-Tetrazine 反应：

TCO-PEG-NH₂ 修饰的载体与 Tetrazine 标记的配体（如抗体、荧光探针）在生理条件（PBS，pH 7.4，室温）下孵育 10-30 分钟，完成快速标记。

反应监控：

通过荧光光谱或 HPLC 验证反应效率（通常 >90%）。

3. 氨基修饰与功能化

靶向配体固定：

氨基通过 EDC/NHS 反应与羧酸化配体（如 cRGD-COOH）偶联，反应条件为 MES 缓冲液（pH 5.5），室温反应 4-6 小时。

点击化学修饰：

氨基通过 CuAAC 反应与炔基化分子（如炔基-荧光素）偶联，需在 CuSO₄/TBTA 催化下进行，室温反应 2-4 小时。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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