AF405-HRP，AF405标记过氧化物酶（辣根）的结构与制备方法

产品名称：AF405-HRP，AF405标记过氧化物酶（辣根）的结构与制备方法

1. 结构与制备方法

1.1 化学结构

L-谷氨酰胺：白色结晶性粉末，分子式为C₅H₁₀N₂O₃，分子量146.15，含一个手性中心（L-构型），是蛋白质合成中的编码氨基酸，参与氮代谢和能量传递。

罗丹明标记：罗丹明B（Rhodamine B）通过共价键（如酰胺键）与L-谷氨酰胺的氨基结合，形成RB-L-Glutamine。罗丹明B的激发波长约550 nm，发射波长580 nm（橙红色荧光）。

1.2 制备步骤

活化罗丹明：使用N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）等试剂活化罗丹明的羧基，形成活性酯。

偶联反应：在PBS缓冲液或DMSO中，活化罗丹明与L-谷氨酰胺的氨基反应，生成RB-L-Glutamine。

纯化与验证：通过高效液相色谱（HPLC）、薄层色谱（TLC）或透析纯化产物，利用UV-Vis光谱和质谱（MS）确认标记成功及纯度（≥95%）。

2. 理化性质

2.1 荧光特性

罗丹明B：激发波长550 nm，发射波长580 nm（橙红色荧光），光稳定性佳，适合长时间成像。

标记物：RB-L-Glutamine保留罗丹明的荧光特性，可在荧光显微镜下清晰观察细胞内谷氨酰胺的分布和摄取。

2.2 溶解性与稳定性

溶解性：L-谷氨酰胺易溶于水（18℃时溶解度2.59%），微溶于乙醇，几乎不溶于乙醚；RB-L-Glutamine的溶解性因标记而略有变化，但通常保持较好的水溶性。

稳定性：L-谷氨酰胺在中性溶液中稳定，酸/碱或高温下易分解；RB-L-Glutamine需避光保存，避免反复冻融，以维持荧光活性。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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