sulfo-Cy2-Mal,磺化花氰染料CY2-马来酰亚胺的核心特性
产品名称:sulfo-Cy2-Mal,磺化花氰染料CY2-马来酰亚胺的核心特性
一、Sulfo-Cy2与马来酰亚胺的核心特性
1. Sulfo-Cy2染料:水溶性绿色荧光探针
光谱特性:Sulfo-Cy2是Cy2的磺化衍生物,属于花菁染料家族,激发波长约480nm(蓝光),发射波长约500nm(绿色荧光),与FITC光谱接近但光稳定性更优。
磺化修饰优势:通过引入磺酸基团(-SO₃H),显著提高水溶性和生物相容性,减少非特异性吸附(如细胞膜或塑料器皿),适合体内外实验。
2. 马来酰亚胺(Maleimide):巯基特异性反应基团
反应活性:马来酰亚胺的α,β-不饱和双键可与巯基(-SH)发生 迈克尔加成反应,生成稳定的硫醚键,是蛋白/抗体标记中最常用的巯基偶联方法。
应用场景:优先与还原后的蛋白(如抗体、酶)中的半胱氨酸残基反应,实现定点标记,避免干扰其他功能基团(如氨基)。
二、Sulfo-Cy2-Mal的标记原理与制备
1. 标记原理
反应基团:Sulfo-Cy2-Mal的分子结构中,马来酰亚胺基团作为“巯基反应模块”,Sulfo-Cy2作为“荧光报告模块”。标记时,马来酰亚胺与目标分子(如抗体)的巯基共价结合,Sulfo-Cy2提供荧光信号。
反应条件:通常在弱碱性缓冲液(如PBS,pH 7.0-7.5)中进行,室温避光反应1-2小时,通过透析或凝胶过滤去除未反应的Sulfo-Cy2-Mal。
2. 制备关键点
目标分子预处理:若标记对象(如抗体)不含游离巯基,需通过还原剂(如DTT、TCEP)还原二硫键,释放巯基,再通过脱盐柱去除还原剂。
标记比例控制:Sulfo-Cy2-Mal与目标分子的摩尔比需优化(通常1:1-5:1),过高可能导致蛋白聚集或荧光淬灭,过低则信号强度不足。
活性验证:标记后需检测目标分子的生物活性(如抗体的抗原结合能力),可通过ELISA或流式细胞术验证。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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