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Cy5-trichosanthin,Cy5标记天花粉蛋白的化学偶联

2025-08-26 分享

Cy5-trichosanthin,Cy5标记天花粉蛋白的化学偶联

通过化学偶联制备而成的荧光标记复合物。天花粉蛋白分子量约27 kDa,属于核糖体失活蛋白(RIP),具有良好的折叠稳定性和特定的空间构象,其中富含赖氨酸和少量半胱氨酸残基,为染料标记提供了反应位点。Cy5染料一般通过其活化酯(如Cy5-NHS ester)与蛋白质的游离氨基(主要是赖氨酸侧链或N-端氨基)形成稳定的酰胺键,从而实现共价连接。通过调节染料与蛋白的摩尔比,可以控制标记度,避免荧光淬灭或蛋白功能丧失。

在表面功能化应用中,Cy5-天花粉蛋白的优势在于它既保留了TCS的蛋白质性质,又引入了稳定且高量子产率的近红外荧光标签。Cy5的发射波长约670 nm,能够降低背景自发荧光干扰,适用于玻片、纳米材料或微流控芯片的表面修饰。典型的功能化方式包括:① 将Cy5-TCS通过生物素-亲和素体系固定到链霉亲和素修饰的玻片或微阵列表面;② 通过表面活性基团(如羧基、醛基、环炔DBCO等)与Cy5-TCS上的赖氨酸或半胱氨酸残基进一步共价连接;③ 借助聚乙二醇(PEG)衍生物实现柔性间隔臂接枝,提高表面探针的取向与可及性。

表面功能化后的Cy5-TCS在微阵列构建、蛋白-小分子相互作用检测、荧光成像和传感平台中具有突出应用。通过荧光显微成像,可以直观追踪蛋白在表面的分布与密度;通过控制表面基团密度和偶联条件,可实现单分子层级的可控固定化。功能化过程中的表征通常依赖紫外-可见光谱(检测Cy5吸收峰)、荧光光谱(确认发射波长与强度)、SDS-PAGE荧光成像(判断偶联效率),以及表面等离子体共振(SPR)或椭偏仪测定表面结合量。

产品名称:Cy5-trichosanthin,Cy5标记天花粉蛋白

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

.Cy5-trichosanthin

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc