DSPE-PEG-Lysozyme,二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-溶菌酶的合成方法
产品名称:DSPE-PEG-Lysozyme,二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-溶菌酶的合成方法
一、合成方法
共价偶联法
步骤:DSPE-PEG的羧基通过EDC(氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐)和NHS(羟基磺基琥珀酰亚胺)活化,形成稳定的中间体,再与溶菌酶的伯胺结合。
条件:在MES缓冲液(pH 6.0)中进行,通过凝胶过滤(如Sephadex G-50)去除未反应的蛋白质和试剂。
马来酰亚胺-巯基反应
步骤:DSPE-PEG-Mal(马来酰亚胺修饰的PEG)与溶菌酶的巯基(-SH)反应,形成共价键。
优势:反应条件温和,特异性高,适用于巯基修饰的蛋白质。
二、物理化学性质
脂质体特性
DSPE的疏水性尾部嵌入脂质双层,形成稳定的脂质体结构,可包裹亲水或疏水药物。
PEG层形成“隐形”涂层,减少网状内皮系统(RES)的识别,延长血液循环时间。
溶菌酶活性保留
溶菌酶通过共价连接至PEG末端,其酶活性在修饰后仍保持较高水平(如pH 4-7时,100℃处理45分钟仍有效)。
碱性条件下(pH>7)可能降低活性,需优化连接条件以保持稳定性。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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