DSPE-PEG-GNGRGGYC,磷脂-聚乙二醇-GNGRGGYC序列肽的合成方法
产品名称:DSPE-PEG-GNGRGGYC,磷脂-聚乙二醇-GNGRGGYC序列肽的合成方法
合成方法
1. DSPE-PEG 的活化
试剂:使用 DSPE-PEG-马来酰亚胺(Mal)或 DSPE-PEG-NHS 酯作为活化中间体。
反应条件:
将 DSPE-PEG-Mal 或 DSPE-PEG-NHS 溶解于无水 DMSO 或 DMF 中(浓度 5-10 mg/mL),氮气保护下避免水解。
2. 甘草次酸的修饰与偶联
修饰步骤:
甘草次酸(GA)需引入活性基团(如氨基或巯基)以便与 DSPE-PEG 偶联。例如,通过酯化反应在 GA 的羧酸基团上引入氨基,生成 GA-NH₂。
偶联反应:
反应原理:DSPE-PEG-Mal 的马来酰亚胺基团与 GA-NH₂ 的氨基发生加成反应,形成稳定的酰胺键。
操作步骤:
将 GA-NH₂ 溶于 PBS 缓冲液(pH 7.2-7.4),加入还原剂(如 TCEP)保持氨基活性。
缓慢将 GA-NH₂ 溶液滴加至 DSPE-PEG-Mal 溶液中,摩尔比控制为 1.2-1.5:1(GA:DSPE-PEG-Mal)。
室温下反应 4-6 小时,通过 HPLC 或 MS 监测反应进程。
反应完成后,通过透析或超滤去除未反应的 GA 和副产物。
3. 最终产物的纯化与表征
纯化方法:
使用透析袋(MWCO 3.5 kDa)去除未反应的小分子,或通过超滤离心管(10 kDa 截留分子量)浓缩产物。
表征手段:
核磁共振(NMR):确认 GA 与 DSPE-PEG 的连接位置及结构完整性。
质谱(MS):验证分子量及偶联效率。
凝胶渗透色谱(GPC):分析产物的分子量分布及纯度。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
关于我们:
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