CY7-Fibrinogen,CY7标记纤维蛋白原反应机理特点
CY7-Fibrinogen,CY7标记纤维蛋白原反应机理特点
CY7-Fibrinogen 是将近红外荧光染料 Cyanine7 与纤维蛋白原(Fibrinogen, Fg)共价偶联形成的功能化蛋白分子。纤维蛋白原是一种高分子量血浆蛋白,参与凝固过程,具有多个赖氨酸、半胱氨酸及羧基官能团。通过CY7标记,分子获得近红外荧光特性(激发约750–780 nm,发射约780–810 nm),实现可视化示踪及蛋白功能研究。
反应机理特点:
共价偶联策略:常用CY7-NHS酯偶联纤维蛋白原表面赖氨酸氨基,形成稳定酰胺键。反应属于亲核取代反应,赖氨酸氨基作为亲核试剂攻击NHS活性酯碳原子,实现共价键形成。
反应体系:反应在缓冲液(如PBS pH 7.4–8.0)中进行,维持蛋白构象,避免高温或强酸碱导致蛋白变性。缓冲体系提供适宜pH,使氨基的亲核性佳。
选择性机制:赖氨酸氨基位于蛋白表面,易于反应,而半胱氨酸巯基可通过不同活性基团(如MAL或DBCO)进行选择性标记,实现多重标记策略。
偶联反应动力学:NHS酯-氨基反应迅速,在室温条件下数小时即可完成。反应速度受温度、pH、蛋白浓度及NHS酯摩尔比影响。
保护与优化:若蛋白中存在敏感基团,可通过低温或添加稳定剂(如甘油、蔗糖)保护蛋白构象,同时通过摩尔比调节控制标记密度,避免过度偶联导致活性丧失。
纯化与表征:偶联完成后,通过透析或凝胶过滤去除未反应染料,产物通过UV-Vis吸收谱及荧光光谱验证标记效率。荧光强度随标记度增加而增强,但需控制以保持蛋白功能。
应用价值:CY7-Fibrinogen 可用于血栓形成示踪、蛋白质相互作用研究及生物成像实验。其反应机理体现了NHS酯-蛋白氨基的高选择性和温和条件偶联优势,为功能蛋白标记提供可靠方案。
产品名称:CY7-Fibrinogen,CY7标记纤维蛋白原
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc