CY7-Aprotinin-Protein，CY7标记的抑蛋白酶反应原理

CY7-Aprotinin-Protein，CY7标记的抑蛋白酶反应原理

CY7-Aprotinin是一种通过将近红外荧光染料Cyanine7（CY7）与抑蛋白酶Aprotinin偶联形成的功能性分子。Aprotinin是一种小分子抑蛋白酶，具有抑制多种丝氨酸蛋白酶的活性，在体外酶学研究和药物递送中具有重要作用。CY7标记赋予Aprotinin近红外荧光性能（吸收约750 nm，发射约770–790 nm），用于生物成像、分布追踪及酶活性研究。

反应原理

偶联化学

CY7标记通常通过NHS酯（针对氨基）或马来酰亚胺（MAL，针对巯基）实现与Aprotinin的共价结合。

在CY7-NHS酯偶联中，Aprotinin赖氨酸侧链氨基作为亲核试剂攻击NHS酯碳原子，形成稳定酰胺键，偶联位置可通过控制摩尔比和反应时间进行优化。

在CY7-MAL偶联中，Aprotinin中或修饰的半胱氨酸巯基与马来酰亚胺发生亲核加成反应，形成稳定的硫醚键。

反应条件

缓冲体系通常为PBS或碳酸盐缓冲液（pH 7–8），保证氨基和巯基处于活性状态，同时保护蛋白三级结构完整。

反应温和（4–25°C），反应时间数小时至过夜，避免蛋白变性或聚集。

反应过程中可加入微量碱性试剂（如三乙胺）促进氨基脱质子化，提高亲核性和偶联效率。

结构稳定性

偶联后Aprotinin的蛋白骨架和活性位点保持完整，荧光标记位于表面，不影响抑蛋白酶活性。

CY7染料空间分布均匀，减少荧光猝灭和蛋白聚集的风险。

纯化与表征

通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的CY7及副产物。

UV-Vis吸收和荧光光谱可确认标记成功，质谱和SDS-PAGE可验证蛋白完整性和偶联位点。

应用价值

酶活性研究：CY7-Aprotinin可实时监测蛋白酶抑制过程和动力学变化。

生物示踪：近红外荧光便于体内外分布追踪。

药物递送：可作为载体或功能化分子用于靶向递送和分子示踪。

产品名称：CY7-Aprotinin-Protein，CY7标记的抑蛋白酶

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc