Cy7-PE/Streptavidin，Cy7藻红蛋白/链霉亲和素偶联物的原理

Cy7-PE/Streptavidin，Cy7藻红蛋白/链霉亲和素偶联物的原理

Cy7-PE/Streptavidin是一种将近红外荧光染料Cyanine7标记的藻红蛋白（PE）与链霉亲和素（Streptavidin, SA）偶联形成的复合物。该偶联物结合了PE的荧光性质、Cy7近红外发射能力以及链霉亲和素与生物素（Biotin）高度特异结合的特性，是生物标记、分子探针及免疫检测的重要工具。

反应机理：

活化与偶联原理

Cy7-PE一般通过NHS酯或Maleimide与蛋白偶联，获得带有活性基团的荧光蛋白。链霉亲和素可通过氨基、羧基或巯基参与偶联反应。常用偶联策略包括：

酰胺键形成：Cy7-PE上的NHS酯与链霉亲和素赖氨酸的氨基反应，形成稳定的酰胺键。

巯基偶联：如果SA经过巯基引入修饰，Maleimide-Cy7-PE可通过巯基-烯键反应实现共价结合。

反应选择性与条件

反应在温和缓冲液（如PBS pH 7.2–8.0）中进行，温度通常为4–25°C，以保护PE色素和SA结构。摩尔比及反应时间需控制，避免过度交联导致复合物沉淀或荧光猝灭。反应过程中避免强光照射，以防Cy7光漂白。

非共价自组装辅助

在部分设计中，链霉亲和素可通过生物素-链霉亲和素非共价结合与Cy7-PE构建复合体系，这种方式利用SA四聚体的四个生物素结合位点实现多价荧光蛋白偶联，提高复合物稳定性与信号增强效果。

纯化与功能验证

偶联完成后，通过凝胶过滤、透析或亲和色谱去除未反应的Cy7-PE及游离蛋白。通过SDS-PAGE、UV-Vis吸收和荧光光谱检测偶联效率、荧光性能及复合物稳定性，确保SA活性位点保留、生物素结合能力不受影响。

应用优势

Cy7-PE/Streptavidin结合了多功能特性：PE荧光信号强、Cy7近红外发射可减少背景干扰、SA提供高度特异生物素结合能力，可用于免疫标记、分子探针、多重标记实验及近红外成像。偶联物在体外及体内均表现出稳定性和生物相容性，适用于高灵敏荧光检测及可视化分子操作。

产品名称：Cy7-PE/Streptavidin

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc