FITC-UrolithinA,荧光素标记尿石素A的反应条件概述
FITC-UrolithinA,荧光素标记尿石素A的反应条件概述
FITC-Urolithin A是通过将异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)与尿石素A(Urolithin A, UA)共价偶联形成的荧光衍生物。尿石素A是一种由肠道微生物代谢多酚类物质(如鞣花酸衍生物)产生的小分子化合物,具有良好的生物活性和代谢稳定性。FITC标记使尿石素A获得绿色荧光(激发约495 nm,发射约520 nm),便于在体外实验中追踪其分布与细胞摄取。
反应条件概述:
溶剂选择
FITC和尿石素A均易溶于性有机溶剂,如二甲基亚砜(DMSO)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或乙醇。
为保证反应效率,通常在DMSO或含少量碳酸氢盐缓冲液体系中进行。
pH条件
异硫氰酸基与羟基或胺基的亲核加成反应在弱碱性环境下为高效,通常控制pH在8–9。
过酸条件会降低异硫氰酸基的活性,过碱条件可能引起尿石素A或FITC降解。
温度与反应时间
室温(20–25℃)反应通常2–4小时即可完成;若反应速度慢,可在低温(4℃)下延长反应时间以提高选择性并减少副反应。
摩尔比与搅拌
为保证高偶联效率,通常使用FITC与尿石素A摩尔比为1.2–1.5:1。
缓慢滴加FITC并轻柔搅拌有利于均匀反应,防止荧光漂白和溶液聚集。
后处理
反应完成后,通过透析、硅胶柱或高效液相色谱(HPLC)去除未反应FITC和小分子副产物。
精制后的FITC-Urolithin A在PBS缓冲液或少量DMSO中稳定,可用于细胞和体外实验。
该条件保证了FITC与尿石素A高效、选择性偶联,同时保持化合物的荧光性能和化学活性,适合于荧光示踪和药物代谢研究。
产品名称:FITC-UrolithinA,荧光素标记尿石素A的
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc