FITC-VP22，荧光素标记穿膜肽VP22的反应机理概述

FITC-VP22，荧光素标记穿膜肽VP22的反应机理概述

FITC-VP22是由异硫氰酸荧光素（FITC）与VP22肽共价偶联形成的荧光衍生物。VP22是一种来自单纯疱疹（HSV-1）的穿膜蛋白片段，能够高效穿透细胞膜并介导大分子（如蛋白质、核酸）在细胞间转运。FITC标记赋予VP22绿色荧光（激发约495 nm，发射约520 nm），可用于细胞摄取和亚细胞定位研究。

反应机理概述：

偶联原理

FITC分子上的异硫氰酸基（–N=C=S）是强亲电基团，可与VP22肽链中的游离氨基（通常是N端氨基或赖氨酸ε-氨基）发生亲核加成反应。

反应中氨基的孤电子对攻击异硫氰酸碳，形成稳定的硫脲键（–NH–C(=S)–NH–），完成荧光素的共价结合。

反应选择性

由于VP22肽中可能含有多个氨基残基，FITC偶联主要发生在无保护的N端或赖氨酸残基。

通过保护侧链氨基或调控FITC摩尔比，可获得单一标记位点，提高荧光均一性。

动力学与环境因素

反应在弱碱性条件（pH 8–9）下进行，可增加氨基的亲核性，同时保证异硫氰酸基的活性。

室温下反应2–4小时可完成，低温可减少非特异性副反应。

结构与功能保留

FITC标记主要在肽链末端或赖氨酸残基偶联，尽量不影响VP22的穿膜功能。

完成标记后，VP22仍能介导细胞膜穿透和大分子转运，同时荧光可用于示踪和定量分析。

后处理与验证

产品名称：FITC-VP22，荧光素标记穿膜肽VP22

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

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仅用于科研，不能用于人体。小编axc