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CY5.5-Lactate dehydrogenase,花菁染料CY5.5标记乳酸脱氢酶的反应机制

2025-09-18 分享

CY5.5-Lactate dehydrogenase,花菁染料CY5.5标记乳酸脱氢酶的反应机制

Cy5.5-Lactate Dehydrogenase(Cy5.5-LDH)是将近红外荧光染料 CY5.5 共价标记至乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase, LDH)的酶标探针。LDH 是一种多亚基蛋白酶,参与乳酸与丙酮酸之间的可逆转化,存在于细胞质中。CY5.5-LDH 的偶联结合了酶的催化功能与荧光信号,可用于活性监测、代谢成像及酶动力学研究。

反应机制

偶联位点选择

LDH 含有丰富的赖氨酸残基和少量半胱氨酸残基。

CY5.5-NHS 可与赖氨酸的 ε-氨基形成稳定酰胺键。

CY5.5-Mal(马来酰亚胺)可与半胱氨酸巯基形成硫醚键。

偶联选择性保证荧光标记不会破坏酶活性位点。

偶联反应机理

酰胺键形成:CY5.5 的活化羧基(NHS 酯)被 LDH 赖氨酸的氨基亲核攻击,生成稳定酰胺键,同时释放 NHS。

硫醚键形成:CY5.5-Mal 的马来酰亚胺基团与 LDH 半胱氨酸巯基发生 Michael 加成反应,形成稳定共价连接。

反应在中性缓冲液(pH 7–8)中进行,以保持蛋白构象和酶活性。

结构与功能保护

通过控制染料与蛋白摩尔比,避免过度标记导致酶活性下降。

反应温和,短时间偶联,保证 LDH 的四聚体结构稳定。

荧光标记位点多位于蛋白表面,不干扰底物结合口袋。

应用优势

CY5.5-LDH 可用于体外酶活性检测和代谢流追踪。

近红外荧光便于深组织成像和多重标记实验。

可与药物递送系统结合,实现荧光–酶活性双重监测。

反应机制清晰,可精确控制偶联效率和荧光密度。

产品名称:CY5.5-Lactate dehydrogenase,花菁染料CY5.5标记乳酸脱氢酶

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

CY5.5-Lactate dehydrogenase

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc