Cy5-Retinol-Binding Protein,花菁染料CY5标记视黄醇结合蛋白的反应活性分析
Cy5-Retinol-Binding Protein,花菁染料CY5标记视黄醇结合蛋白的反应活性分析
视黄醇结合蛋白(Retinol Binding Protein, RBP)是一类小分子结合蛋白,主要负责视黄醇在及组织间的运输。通过与花菁染料Cy5共价偶联形成Cy5-RBP,可在保持蛋白功能的同时赋予荧光标记,用于生物成像、蛋白追踪及相互作用研究。
反应活性分析:
偶联策略:
Cy5通常以NHS酯或maleimide活性形式存在,可选择性与RBP分子上的赖氨酸残基或半胱氨酸残基偶联。
偶联反应在缓冲体系(如PBS, pH 7–8)下进行,温和条件保证蛋白构象及功能活性。
通过控制Cy5与蛋白摩尔比,可优化标记度,避免过度修饰导致蛋白活性丧失。
蛋白结构与功能影响:
RBP具有疏水性结合口袋用于视黄醇结合,荧光偶联位点通常选择表面赖氨酸残基,避免干扰活性中心。
标记后蛋白仍保持视黄醇结合能力,可用于定量分析蛋白-配体相互作用。
Cy5荧光提供即时信号,便于实时监测蛋白分布和结合行为。
反应活性评价:
标记后的Cy5-RBP可通过荧光强度、吸光度及结合实验评估标记效率。
结合视黄醇或受体的能力可通过荧光共振能量转移(FRET)、荧光偏振或免疫检测方法确认。
反应活性高,标记后蛋白仍可用于体内及体外实验。
稳定性与储存:
Cy5-RBP在缓冲液中水溶性良好,荧光信号稳定。
储存在低温避光条件下,可维持蛋白活性及荧光性能。
避免反复冻融,可延长实验使用寿命。
产品名称:Cy5-Retinol-Binding Protein,花菁染料CY5标记视黄醇结合蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc