RB-EGCG,罗丹明B标记儿茶素的纯化方法
RB-EGCG,罗丹明B标记儿茶素的纯化方法
RB-EGCG是一种通过共价化学反应将可见光荧光染料罗丹明B(Rhodamine B, RB)标记于儿茶素(Epigallocatechin gallate, EGCG)分子上的衍生物。儿茶素是绿茶中主要的多酚类化合物,具有强、及多种生物活性。通过RB标记,EGCG获得可视化荧光特性,可在体外和体内实验中追踪其分布、吸收及代谢,同时保留其生物活性。
纯化方法:
反应后粗产物处理:
RB-EGCG反应结束后,通常通过旋转蒸发除去有机溶剂,得到粗产物。
粗产物可用水相和少量有机溶剂进行分液,去除未反应的游离RB或副产物。
柱层析纯化:
可使用硅胶柱或C18反相柱进行纯化。
以甲醇-水或乙腈-水梯度洗脱,分离标记产物与游离RB和未反应EGCG。
根据荧光信号检测产物,收集含RB-EGCG的组分。
透析或超滤:
对于水溶性RB-EGCG,可使用适当分子量截断的透析膜去除小分子杂质。
超滤技术也可用于去除未结合RB,得到纯化产物。
表征方法:
荧光光谱分析:
RB-EGCG在可见光区域表现出特征性吸收峰和发射峰(约550–580 nm发射),用于确认荧光标记成功。
荧光强度与浓度呈线性关系,可用于定量分析。
紫外-可见光吸收光谱(UV-Vis):
可同时检测EGCG和RB的特征吸收峰,判断标记反应是否完全。
质谱(MS)分析:
ESI-MS或MALDI-TOF可确认RB-EGCG的分子量及结构完整性。
核磁共振(NMR)分析:
^1H-NMR和^13C-NMR可提供结构信息,验证RB与EGCG的共价结合位点。
高效液相色谱(HPLC)分析:
用于检测产物纯度,可分离未反应物和副产物。
结合荧光检测器(FLD),可追踪RB-EGCG组分。
产品名称:RB-EGCG,罗丹明B标记儿茶素
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc