RB-Mannotetraose,罗丹明B标记甘露四糖的合成过程
RB-Mannotetraose,罗丹明B标记甘露四糖的合成过程
RB-Mannotetraose是一种将可见光荧光染料罗丹明B(Rhodamine B, RB)标记于甘露四糖(Mannotetraose)分子上的衍生物。甘露四糖是一种由四个甘露糖单位组成的低聚糖,具有良好的水溶性和生物相容性。通过RB标记,该分子不仅保留了甘露四糖的糖链结构特性,还获得了可视化荧光功能,可用于生物分子追踪、糖类识别及纳米载体功能研究。
合成过程:
活化RB分子:
罗丹明B通常通过羧基活化形成NHS酯(Rhodamine B-NHS),在碳二亚胺类试剂(如EDC)催化下生成活化产物。
活化过程在有机溶剂(如DMF或DMSO)中进行,温和且避免光降解。
RB-NHS的生成提高了与糖分子羟基或氨基的偶联效率。
甘露四糖偶联:
甘露四糖溶于缓冲液(如PBS,pH 7–8),若需偶联于RB-NHS,可在糖分子上引入氨基官能团(通过还原氨化反应或氨基衍生化)。
RB-NHS与甘露四糖衍生物的氨基反应生成稳定酰胺键,形成RB-Mannotetraose。
反应在室温或低温下进行数小时,确保荧光染料和糖结构的稳定性。
反应监控:
可通过薄层色谱(TLC)和荧光检测监控偶联反应的进程。
荧光信号的出现与RB-Mannotetraose的迁移情况相结合,用于判断反应是否完成。
纯化过程:
初步分离:
反应结束后,旋转蒸发去除有机溶剂,并通过水相提取去除未反应的RB-NHS。
可用适量有机溶剂或缓冲液反复洗涤,除去小分子杂质。
柱层析纯化:
使用C18反相硅胶柱,以水-乙腈或水-甲醇梯度洗脱RB-Mannotetraose。
通过荧光检测收集产物组分,去除游离RB和未反应糖衍生物。
透析或超滤:
对水溶性RB-Mannotetraose,可使用透析膜或超滤管去除低分子量杂质,得到纯化产物。
表征方法:
荧光光谱:确认RB特征发射峰。
质谱(MS):验证分子量及偶联成功。
HPLC分析:检测纯度并分离残余未反应物。
产品名称:RB-Mannotetraose,罗丹明B标记甘露四糖
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc