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FITC-Con A,异硫氰基荧光素标记刀豆球蛋白A的应用与功能

2025-09-28 分享

FITC-Con A,异硫氰基荧光素标记刀豆球蛋白A的应用与功能

FITC-Con A是一种通过共价偶联形成的荧光标记糖蛋白复合物,其中Con A(刀豆球蛋白A)是一种来源于刀豆的四聚体凝集素,具有高度特异的糖结合能力,可识别并结合α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基。FITC(异硫氰酸荧光素)则作为荧光标记基团,具有强烈的绿色荧光(激发波长约495 nm,发射波长约519 nm),其异硫氰酸基(–N=C=S)能够与蛋白质的氨基(主要为赖氨酸残基的ε-氨基)形成稳定的共价键,从而实现蛋白质的标记而不影响其糖结合功能。

标记原理

FITC-Con A的形成依赖于异硫氰酸基与蛋白质氨基的亲核加成反应。具体过程为:FITC溶于弱碱性缓冲液(如pH 8.0–9.0的碳酸盐缓冲液),Con A提供可反应的氨基,异硫氰酸基进攻氨基形成稳定的硫脲键。该反应条件温和,避免蛋白质变性,同时保证荧光基团均匀标记,使标记后的Con A仍保留糖结合活性。标记后的复合物呈绿色荧光,可用于荧光显微镜、流式细胞术和荧光酶标分析等多种检测平台。

应用与功能

FITC-Con A常用于细胞膜糖结构的可视化、糖蛋白定位、细胞表面糖基分布分析以及细胞识别和信号转导研究。在活细胞实验中,由于FITC-Con A能特异结合细胞表面的甘露糖残基,可实现细胞膜或胞内糖蛋白的荧光标记。其绿色荧光特性可与其他红色或远红外荧光染料联合使用,便于多通道多标记实验。

生物相容性

FITC-Con A在适宜浓度下对细胞的生物相容性良好,不影响细胞膜完整性或活力。然而,由于Con A本身具有凝集活性,高浓度可能引起细胞聚集,因此实验中需控制浓度和孵育时间。其温和的标记与操作条件适用于活细胞和固定细胞实验。

产品名称:FITC-Con A,异硫氰基荧光素标记刀豆球蛋白A

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

FITC-Con A

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc