异硫氰酸-羧乙基壳聚糖,FITC-羧乙基壳聚糖的介绍
异硫氰酸-羧乙基壳聚糖(Fluorescein Isothiocyanate-Carboxyethyl Chitosan,简称FITC-羧乙基壳聚糖,或FITC-CE-Chitosan)是一种将荧光素(FITC)与改性壳聚糖偶联形成的功能性生物高分子探针。
FITC标记原理
FITC(Fluorescein Isothiocyanate,荧光素异硫氰酸酯)是一种常用的绿色荧光染料,激发波长约490–495 nm,发射波长约520–530 nm。FITC的异硫氰酸基(–N=C=S)具有很高的化学活性,能够与氨基(–NH2)反应形成稳定的硫脲键。
在FITC-羧乙基壳聚糖的制备中,CE-Chitosan上的游离氨基成为FITC偶联的主要反应位点,从而将荧光分子固定在水溶性的生物高分子骨架上,实现可追踪和可视化的功能。
制备方法
壳聚糖改性
将壳聚糖通过羧乙基化反应,将部分氨基或羟基转化为羧乙基基团,以改善水溶性。
FITC偶联
将FITC溶解于适宜的有机溶剂(如DMSO或乙醇),在弱碱性条件下与羧乙基壳聚糖溶液混合。
异硫氰酸基与壳聚糖上的游离氨基发生反应,形成稳定的硫脲键,将FITC固定在壳聚糖上。
纯化与干燥
通过透析或凝胶过滤去除未反应的FITC和小分子杂质,得到纯化的FITC-羧乙基壳聚糖。
最终产物可冻干储存,低温避光保存,以保持荧光活性。
物理化学性质
溶解性:CE-Chitosan改性后水溶性显著增强,FITC标记后仍可在中性水溶液中溶解。
荧光性质:FITC提供强烈绿色荧光,激发波长约490–495 nm,发射波长约520–530 nm,可用于显微成像和光谱检测。
分子量:取决于原壳聚糖的分子量及改性程度,一般在10–200 kDa范围。
稳定性:在中性至弱碱性条件下稳定,酸性环境可能影响荧光强度,避免长期暴露于光照下。
生物学功能与应用
细胞成像与追踪
FITC-羧乙基壳聚糖可被细胞摄取,用于实时观察纳米载体、药物载体或水凝胶在细胞内的分布与运输。
药物递送系统
作为载体材料,FITC-CE-Chitosan可用于包裹药物或基因材料,通过荧光追踪实现递送效率和靶向性的研究。
组织工程与生物材料研究
可制备荧光标记的水凝胶、膜或纳米颗粒,用于组织修复、支架材料评价及体内降解动态观察。
生物传感
壳聚糖的多羟基和氨基使其可进一步修饰其他功能基团,与FITC结合后可制备糖传感器或pH响应探针。
名称:异硫氰酸-羧乙基壳聚糖
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
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