AF555标记小麦胚芽凝集素（WGA）的核心特性与原理

产品名称：AF555标记小麦胚芽凝集素（WGA）的核心特性与原理

1. 核心特性与原理

AF555荧光染料特性

光谱属性：激发波长555-557nm，发射波长570nm，呈橙红色荧光，兼容Cy3/TRITC滤光片，适用于荧光显微镜、流式细胞术及共聚焦成像。

化学稳定性：pH耐受范围广（4-10），光稳定性强，细胞通透性好，适合活细胞长时间成像。

偶联机制：通过马来酰亚胺基团与蛋白质的硫醇基团（-SH）共价结合，形成高亮度、低背景的荧光偶联物，荧光强度优于传统染料。

小麦胚芽凝集素（WGA）特性

分子特性：36kDa凝集素，特异性结合N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和唾液酸（Neu5Ac），对细胞膜糖蛋白（如哺乳动物细胞、革兰氏阳性菌、酵母）及纤维化瘢痕组织具有高亲和力。

应用优势：无需透化即可标记活细胞膜，透化后可染色细胞内结构（如高尔基体、内质网）；支持固定细胞染色，兼容免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）及流式细胞术（FC）。

2. 标记方法与实验步骤

试剂盒与偶联策略

快速标记试剂盒：如Alexa Fluor 555标记试剂盒，通过化学偶联将AF555连接到WGA的氨基或硫醇基团，操作简便，适合标准化实验。

溶液配制：储备液（2mg/mL）需用ddH₂O溶解，工作液浓度通常为5-10μg/mL（根据细胞类型优化），缓冲液推荐HHBS（含钙镁离子以维持凝集素活性）。

实验流程

细胞准备：活细胞或4%甲醛固定细胞，清洗后加入AF555-WGA工作液。

孵育：37℃避光孵育10-30分钟（活细胞）或室温孵育（固定细胞），避免光照以减少荧光淬灭。

清洗：用HHBS缓冲液清洗2次，去除未结合标记物。

成像：荧光显微镜（Cy3/TRITC通道）或流式细胞术（PE/Texas Red通道）观察，可与Hoechst 33342（核染色）共定位。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

我们可以提供的相关产品

DSPE-PEG2000-HA50000;磷脂聚乙二醇透明质酸

DSPE-PEG2000-HA50000;磷脂PEG透明质酸

DSPE-PEG2000-HA10kDa;磷脂-聚乙二醇-透明质酸

DSPE-PEG2000-HA10000;磷脂-聚乙二醇-透明质酸

DSPE-PEG2000-HA10000;磷脂聚乙二醇透明质酸

DSPE-PEG2000-HA10000 磷脂-聚乙二醇-透明质酸

DSPE-PEG2000-HA;磷脂-聚乙二醇-透明质酸