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6-HEX Phosphoramidite,1360547-55-2的反应机制

2025-10-13 分享

6-HEX Phosphoramidite,1360547-55-2的反应机制

6-HEX Phosphoramidite(CAS号:1360547-55-2)是一种用于寡核苷酸合成的荧光标记试剂,常用于实时荧光定量PCR(qPCR)、分子探针、毛细管电泳(CE)和基因组学研究中。作为5′-Hexachlorofluorescein(HEX)荧光染料的磷酰胺化衍生物,其结构和反应机制在合成过程中起着关键作用。

反应机制

在寡核苷酸合成中,6-HEX Phosphoramidite作为一个磷酰胺化试剂,参与合成过程中的加成反应。其反应机制可概括为以下几个步骤:

  1. 去保护:首先,去除固相支持物上的5′-保护基团(通常为DMT基团),暴露出5′-羟基。

  2. 活化:使用活化试剂(如氯化氮(NCl₃)或氯化氮/二甲基亚砜(DMSO)混合物)对6-HEX Phosphoramidite进行活化,生成一个具有高反应性的中间体。

  3. 加成:活化后的6-HEX Phosphoramidite与固相支持物上的5′-羟基发生亲核加成反应,形成一个新的磷酸二酯键。

  4. 氧化:为了稳定新形成的磷酸二酯键,通常使用氧化剂(如碘化吡啶)进行氧化,生成稳定的磷酸酯结构。

这一系列反应步骤确保了6-HEX荧光标记的寡核苷酸的合成效率和准确性。

三、应用领域

6-HEX Phosphoramidite广泛应用于以下领域:

  • 实时荧光定量PCR(qPCR):作为荧光探针的标记物,6-HEX用于实时监测PCR扩增过程。

  • 分子探针:用于杂交探针的合成,检测特定的核酸序列。

  • 基因组学研究:在基因表达分析和突变检测中,作为荧光标记的工具。

  • 毛细管电泳(CE)分析:用于DNA片段的分离和分析。

6-HEX Phosphoramidite

产品名称:6-HEX Phosphoramidite

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc