链霉亲和素-AF430偶联物,Streptavidin, AF430 conjugate的制备工艺与质量控制
产品名称:链霉亲和素-AF430偶联物,Streptavidin, AF430 conjugate的制备工艺与质量控制
1. 制备工艺与质量控制
偶联策略:
化学偶联:通过N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯或马来酰亚胺(Mal)活性基团,与链霉亲和素的氨基或巯基反应,实现定向偶联。
位点特异性标记:利用基因工程引入半胱氨酸标签或生物素化标签,实现可控偶联,减少对生物素结合位点的影响。
比例控制:通过调节染料与蛋白的比例(如1:1、2:1、4:1),优化荧光强度与蛋白活性平衡。
纯化与表征:
色谱纯化:采用凝胶过滤(如Sephadex G-25)或离子交换色谱去除游离染料及未偶联蛋白,确保产品纯度>95%。
光谱验证:通过紫外-可见光谱、荧光光谱确认染料负载量及光谱特性。
活性测试:通过生物素结合实验(如ELISA、SPR)验证链霉亲和素的生物活性保留。
2. 稳定性与储存条件
储存稳定性:
固体状态:-20℃避光保存,避免反复冻融;链霉亲和素在低温下稳定,但荧光染料可能随时间缓慢降解。
溶液状态:建议分装后-80℃保存,或使用含稳定剂(如BSA、甘油)的缓冲液(如PBS,pH 7.4),延长货架期。
使用条件:
pH敏感性:在pH 6-9范围内稳定,避免极端pH导致蛋白变性或染料淬灭。
光敏感性:使用时避光操作,避免长时间光照导致荧光衰减。
温度控制:实验操作在4-37℃进行,避免高温导致蛋白失活或染料分解。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
关于我们:
良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌,良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者,公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器,良好有完备的生产,研发,检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品,公司目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等。
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