ATTO Rho 6G NHS Ester的化学结构与荧光特性

产品名称：ATTO Rho 6G NHS Ester的化学结构与荧光特性

1. 化学结构与荧光特性

结构基础：以罗丹明6G为母体，通过化学修饰引入NHS酯活性基团，分子量约711 g/mol（NHS酯形式），亲水性良好。

荧光性能：

激发/发射波长：激发峰533 nm，发射峰557 nm（绿色荧光），与罗丹明6G相似但亮度更高。

光学参数：摩尔消光系数约1.15×10⁵ M⁻¹cm⁻¹，量子产率高达90%，光稳定性良好，适合长时间成像及单分子检测。

pH适应性：在pH 2-11范围内荧光强度稳定，兼容酸性/碱性实验环境。

2. 反应机制

特异性反应：NHS酯与氨基发生亲核取代反应，生成稳定的酰胺键。反应需在碱性条件（pH 8.3）下进行，常用0.1-0.2 M碳酸氢钠缓冲液。

条件控制：

竞争反应：需避免胺类物质（如Tris、游离氨基酸）干扰，反应体系中不可含铵离子。

水解抑制：NHS酯在碱性条件下易水解，需严格缓冲pH并控制反应时间（通常1小时，5-10分钟可完成主要反应）。

摩尔比优化：染料与蛋白摩尔比通常为10:1至20:1，需通过凝胶过滤或超滤纯化去除游离染料。

3. 应用领域

生物分子标记：标记抗体、酶、核酸（DNA/RNA）、糖蛋白等，用于免疫荧光、Western blot、ELISA等实验。

细胞成像：活细胞/固定细胞荧光显微成像（如共聚焦显微镜）、流式细胞术（FACS）检测膜蛋白/受体表达。

多重标记：与Cy系列、ATTO系列其他染料（如ATTO 725）组合，实现多通道荧光检测。

单分子研究：高量子产率特性适合单分子荧光检测及FRET（荧光共振能量转移）实验。

4. 使用注意事项

反应体系：蛋白质需预先溶解于无胺缓冲液（如碳酸氢钠），避免Tris/甘氨酸等含氨基缓冲液。

纯化步骤：反应后需通过Sephadex G-25凝胶过滤或超滤离心分离标记产物与游离染料，确保标记度（DOL）可控。

安全操作：佩戴防护装备，避免皮肤/眼睛接触；储存时充入惰性气体（如氮气）防止氧化。

应用限制：仅供科研使用，不可用于临床诊断；需优化反应条件（如pH、温度、染料比例）以减少非特异性标记。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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