BODIPY 530/550 NHS Ester的定义与化学本质

产品名称：BODIPY 530/550 NHS Ester的定义与化学本质

1. 定义与化学本质

BODIPY 530/550 NHS Ester（CAS号：216961-93-2）是一种橙色荧光标记试剂，属于硼二吡咯甲烷（BODIPY）类染料衍生物。其核心结构由BODIPY发色团与N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS Ester）活性基团组成，分子式为C₂₈H₂₂BF₂N₃O₄，分子量约513.31。NHS酯可特异性共价偶联生物分子中的伯胺基团（如蛋白质、抗体、肽段的赖氨酸残基），形成稳定酰胺键，适用于荧光标记与功能化修饰。

2. 光谱特性

激发/发射波长：激发波长530–535 nm，发射波长545–551 nm，发射光谱窄，适合多重荧光标记（如与Cy3、Cy5、DAPI配合）。

光学性能：量子产率接近1.0，光稳定性良好（抗光漂白能力强于FITC/Cy3），pH耐受范围广（pH 4–10稳定），激发态寿命约5纳秒，支持荧光偏振测定和双光子显微镜应用。

光谱优势：与FITC/Alexa Fluor 488相比，光谱分离性更佳，减少串扰信号，适用于共聚焦显微镜、FRET实验等高精度检测场景。

3. 核心应用领域

生物分子标记：用于蛋白质、抗体、肽段的荧光标记，应用于流式细胞术、荧光显微镜成像、免疫荧光、Western blot等实验。

核酸工具构建：标记氨基修饰的寡核苷酸、siRNA、引物，用于DNA探针、基因检测及微阵列分析。

脂质与膜研究：疏水性特性使其适合细胞膜、脂滴等亲脂性结构的染色，助力脂质代谢、膜动力学及信号传导研究。

材料功能化：修饰聚合物、纳米粒子、微球、水凝胶等载体，用于诊断材料、传感器及智能材料开发。

多重标记系统：与Cy3、Cy5等染料联用，提升多通道检测的信号区分度。

4. 操作与储存规范

反应条件：在pH 7.2–8.5的缓冲液（如碳酸氢钠缓冲液）中，NHS酯与伯胺在室温下反应1小时，推荐使用无水DMF/DMSO溶解试剂，蛋白浓度需≥2 mg/mL以优化标记效率。

纯化方法：通过凝胶过滤柱（如Sephadex G-25）或透析去除游离染料，避免背景干扰。

储存条件：-20°C至-30°C干燥避光保存，避免水分和高温；标记后样品需避光以延长荧光活性。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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