AF488 C5 Maleimide的化学结构与荧光特性
产品名称:AF488 C5 Maleimide的化学结构与荧光特性
1. 化学结构与荧光特性
结构基础:以Alexa Fluor 488为核心荧光团(磺化罗丹明衍生物),分子式C₃₁H₂₉N₄NaO₁₂S₂,分子量约720-736 g/mol。C5链(五碳连接臂)连接荧光团与马来酰亚胺基团,增强空间灵活性并减少对生物分子构象的干扰。
荧光性能:
激发/发射波长:激发峰495-499 nm,发射峰519-520 nm(绿色荧光),兼容标准FITC通道。
光学参数:量子产率高达0.9-0.95,摩尔消光系数约70,000-80,000 cm⁻¹M⁻¹,光稳定性良好,抗光漂白能力强,适合长时间成像及动态追踪。
pH适应性:在生理pH(4-10)范围内荧光稳定,兼容细胞内外环境。
2. 反应机制
特异性反应:马来酰亚胺基团与巯基发生迈克尔加成反应,形成稳定硫醚键。反应需在中性pH(如100 mM HEPES或PBS缓冲液,pH 7.4)下进行,避免与氨基竞争。
条件控制:
预处理:目标蛋白需用还原剂(如DTT或TCEP)处理以暴露游离巯基,随后通过透析或凝胶过滤去除过量还原剂。
反应优化:染料与蛋白摩尔比通常为5:1至10:1,反应时间2-4小时(室温或4℃),需避光操作。
纯化步骤:反应后需通过透析、Sephadex G-25凝胶过滤或超滤离心去除游离染料,确保标记效率(通过SDS-PAGE、MALDI-MS或荧光光谱验证)。
3. 应用领域
生物分子标记:标记含巯基的蛋白质、抗体、肽及寡核苷酸,用于免疫荧光、Western blot、ELISA等实验。
细胞成像:活细胞/固定细胞的共聚焦显微镜成像、流式细胞术(FACS)检测膜蛋白表达及动态追踪。
分子探针构建:用于构建荧光生物传感器或分子探针,实时监测生物分子相互作用(如蛋白质-蛋白质相互作用、酶活性分析)。
多重标记与FRET:与Cy系列、ATTO系列染料(如Cy3/Cy5)组合实现多通道荧光检测,或用于荧光共振能量转移(FRET)实验。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
关于我们:
良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌,良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者,公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器,良好有完备的生产,研发,检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品,公司目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等。
我们可以提供的相关产品
DMG-PEG-Mannose;二肉豆蔲酰PEGH甘露糖
DMG-PEG-Mannose;DMG-PEG-甘露糖
DMG-PEG-Mannose DMG聚乙二醇-Mannose
DMG-PEG-Man;甘露糖PEG二肉豆蔲酰-sn-甘油
DMG-PEG-MAN;二肉豆蔻酰-sn-甘油PEG甘露糖
DMG-PEG-MAL;DMG-聚乙二醇-马来酰亚胺
DMG-PEG-MAL MW;2K;1,2-二肉豆蔻酰-rac-甘油-3-聚乙二醇马来酰亚胺