2,7-二氟荧光素的主要应用
常用名 2,7-二氟荧光素
英文名 2',7'-DIFLUOROFLUORESCEIN
CAS号 195136-58-4
分子量 368.28700
分子式 C20H10F2O5

2,7-二氟荧光素(简称2',7'-Difluorofluorescein)是一种荧光染料,属于荧光素家族的衍生物。其核心结构为苯并呋喃-羧酸体系,在2位和7位羟基位置被氟原子取代。这种取代不仅改变了电子分布,还显著提高了染料的光稳定性和荧光量子产率。其分子末端可与异硫氰酸(NCS)或活性酯(NHS)偶联,实现对蛋白质、寡核苷酸及其他生物分子的标记。
功能与特性
荧光标记功能:可通过氨基或羧基化学反应标记蛋白质、抗体、寡核苷酸或多糖,实现高灵敏度的检测和可视化。
高光稳定性:氟取代增强了光学稳定性,使其在荧光显微镜、流式细胞仪等长时间曝光实验中信号损失小。
兼容性强:可在多种生物缓冲体系中使用,对酸碱环境和离子强度具有较强耐受性。
量子产率高:荧光效率较传统荧光素更高,可获得更亮、更稳定的信号。
主要应用
生物标记:广泛用于蛋白质、抗体或核酸标记,通过荧光检测特定分子。
免疫分析:结合流式细胞术、荧光免疫分析或荧光显微镜,实现目标分子定量和定位研究。
分子追踪:在细胞、组织或分子体系中可用于动态观察分子分布与迁移。
荧光共振能量转移(FRET):可作为FRET供体,与合适的受体染料配合用于分子相互作用研究。
使用注意事项
避免长时间紫外或强光照射,以减少光漂白。
配制溶液时,可先溶于DMSO,再稀释至缓冲液使用,以保证溶解性和稳定性。
储存时应避光、低温保存,干燥条件下可延长有效期。
在高pH环境下易离子化,可能影响荧光强度,需要优化实验条件。
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