Alexa Fluor 647甲基四嗪的化学结构与荧光特性

产品名称：Alexa Fluor 647甲基四嗪的化学结构与荧光特性

化学结构与荧光特性

组成：由Alexa Fluor 647荧光染料（远红/近红外区）与甲基四嗪（Me-Tetrazine）基团共价结合，分子量约1025-1156 Da，分子式含磺酸基团增强水溶性。

光谱特性：

激发波长：647-650 nm（适配633/647 nm激光）

发射波长：668-670 nm（远红/近红外，减少生物自发荧光干扰）

荧光量子产率高，光稳定性强，适合深层组织成像及长时间观测。

反应基团：甲基四嗪通过逆电子需求Diels-Alder反应（IEDDA）与反式环辛烯（TCO）快速特异性结合（反应速率常数达10⁴-10⁵ M⁻¹s⁻¹），实现生物正交标记。

核心应用场景

生物标记：

标记蛋白质、核酸（DNA/RNA）、多肽、抗体等生物分子，用于细胞成像、组织切片分析、蛋白质定位追踪。

适配流式细胞术、共聚焦/荧光显微镜、活体成像（如小鼠模型）。

糖生物学研究：结合糖基化修饰探针，分析细胞表面糖链结构及动态变化。

分子探针开发：构建高灵敏度荧光探针，用于疾病标志物检测、药物筛选及细胞间相互作用研究。

免疫学与神经科学：标记T细胞、神经元等，研究免疫激活机制或神经信号传导。

实验操作要点

标记条件：

缓冲液：PBS（pH 7.0-8.5），需含Ca²⁺/Mn²⁺（维持Con A等蛋白活性）。

反应参数：室温避光反应5-30分钟，染料与目标分子摩尔比2:1至5:1（优化避免过度标记）。

纯化：脱盐柱（如Zeba Spin）去除游离染料，防止非特异性结合。

兼容性：与TCO修饰的生物分子（如TCO-抗体）高效偶联，兼容水相及有机溶剂体系。

注意事项：避免金属离子缺失（影响活性）、酸性环境（pH＜4.5导致结构解离）及反复冻融。

储存与稳定性

长期保存：-20℃避光干燥储存，有效期≥12个月；运输需冰袋。

短期使用：溶解后分装冷冻，24小时内使用；2-8℃可稳定1个月。

光/热敏感性：避免高温（＞30℃）及强光照射，防止荧光淬灭或化学降解。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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