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酪蛋白异硫氰酸荧光素偶联物,FITC-Casein的制备方法

2025-10-22 分享

产品名称:酪蛋白异硫氰酸荧光素偶联物,FITC-Casein的制备方法

结构特性

化学本质:由异硫氰酸荧光素(FITC)与酪蛋白(Casein)通过共价键结合形成。FITC的异硫氰酸酯基团与酪蛋白分子中的游离氨基(如αs1-、β-、γ-、κ-酪蛋白的氨基)反应生成稳定的硫脲键,形成荧光标记复合物。

酪蛋白组成:酪蛋白是牛奶中主要磷脂蛋白,以胶束形式存在,包含多种亚型(如αs1、β、κ-酪蛋白),分子量分布和电荷特性各异,赋予其良好的生物活性。

荧光特性:FITC在488nm激发下发射绿色荧光(518nm),荧光强度与标记浓度正相关,背景荧光低,信噪比高,适合荧光显微镜、流式细胞术等检测。

核心用途

生物医学研究:

细胞成像:标记细胞内酪蛋白分布,追踪蛋白质代谢、内化及相互作用(如通过荧光共振能量转移技术)。

免疫荧光:标记抗体或抗原,用于免疫组化、流式细胞术分析细胞表型、抗原定位及定量。

疾病诊断:辅助检测病原体抗原、自身抗体、血液细胞成分,支持免疫荧光诊断和流式细胞分析。

营养与功能研究:

酪蛋白作为全价蛋白质,提供必需氨基酸,其水解产物具有抗氧化、抗菌、免疫调节等潜在生物活性。

研究酪蛋白在消化道的代谢过程及生物利用度。

制备方法

反应条件:在弱碱性缓冲液(如0.1M碳酸氢钠,pH 8.3-9.5)中,FITC与酪蛋白共价结合,反应需避光、低温(4℃)以减少降解。

纯化步骤:通过透析(截留分子量10kDa)或凝胶过滤(如Sephadex G-25柱)去除未反应的FITC,确保产物纯度。

质量控制:采用质谱(MS)和荧光光谱验证标记效率及荧光特性,确保批次一致性。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

酪蛋白异硫氰酸荧光素偶联物,FITC-Casein

关于我们:

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