酪朊酸-四甲基罗丹明偶联物，TAMRA-Casein的制备方法

产品名称：酪朊酸-四甲基罗丹明偶联物，TAMRA-Casein的制备方法

结构特性

化学本质：由四甲基罗丹明（TAMRA，分子式C₂₆H₂₈N₂O₃，分子量430.52）与酪蛋白（Casein）通过共价键（如酰胺键）结合形成的荧光标记复合物。TAMRA的异硫氰酸酯或NHS酯基团与酪蛋白的游离氨基（-NH₂）反应，形成稳定的硫脲键或酰胺键。

荧光特性：激发波长552nm，发射波长578nm，呈现橙红色荧光，量子产率＞0.3，光稳定性良好，荧光强度与标记浓度正相关，且不依赖pH（在pH 4-8范围内稳定），适合酸性环境（如消化模拟体系）。

分子量：偶联后平均分子量约772.76（基于TAMRA标记后的复合物），溶解性良好，可溶于水及部分有机溶剂（如DMSO、DMF）。

核心用途

蛋白酶活性检测：作为荧光底物，蛋白酶水解TAMRA-Casein后释放荧光信号，强度与酶活性成正比，可检测胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、蛋白酶K等多种蛋白酶，检测下限达纳摩尔级。

蛋白质相互作用研究：用于分析蛋白质结合动力学、结合位点及相互作用网络，如通过荧光共振能量转移（FRET）或荧光偏振技术。

荧光成像与定位：在细胞或组织中追踪酪蛋白分布，用于细胞内化、代谢路径分析及活细胞成像（如共聚焦显微镜、流式细胞术）。

生物医学研究：支持免疫荧光、Western blot、ELISA等实验，辅助疾病诊断（如病原体抗原检测）及药物递送系统研究。

制备方法

反应条件：在弱碱性缓冲液（如0.1M碳酸氢钠，pH 8.3-9.5）中，TAMRA与酪蛋白共价结合，反应需避光、低温（4℃）以减少降解，通常需1-2小时完成。

纯化步骤：通过透析（截留分子量10kDa）或凝胶过滤（如Sephadex G-25柱）去除未反应的TAMRA，确保产物纯度≥95%。

质量控制：采用质谱（MS）、荧光光谱及HPLC验证标记效率、荧光特性及批次一致性。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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