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Alexa Fluor 405标记番茄凝集素,AF 405 Tomato lectin的核心特性

2025-10-23 分享

产品名称:Alexa Fluor 405标记番茄凝集素,AF 405 Tomato lectin的核心特性

核心特性

荧光性能:AF 405为蓝紫色荧光染料,激发波长约405nm,发射波长约421nm,适配405nm紫激光,光稳定性良好(抗淬灭能力强),适合长时间动态监测(如活细胞追踪)。

糖结合特异性:番茄凝集素可特异性识别N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)β1-3/1-4糖链、血型糖蛋白及Tamm-Horsfall糖蛋白,适用于细胞表面糖蛋白/糖脂、组织切片中糖链结构的定位分析。

稳定性:在pH 4-10范围内保持荧光活性,-20℃避光干燥储存可长期保存,避免反复冻融(建议分装使用)。

操作流程

样品准备:

细胞/组织需经固定(如4%多聚甲醛)和透化处理(如0.1% Triton X-100),确保凝集素穿透细胞膜结合糖链。

活细胞实验需优化条件(如低浓度、短时间孵育),减少细胞毒性。

标记反应:

将AF 405 Tomato lectin稀释至10-50 μg/mL(具体浓度需实验优化),与样品在室温或4℃孵育30分钟至数小时(时间依样本类型调整)。

推荐使用PBS(含0.2 mg/mL肝素防非特异性结合)或HEPES缓冲液(pH 7.0-7.4)。

洗涤与纯化:

用冷PBS洗涤3次,每次5分钟,去除未结合凝集素。

标记后若需纯化,可采用透析、凝胶过滤或磁性纳米颗粒吸附法(2小时快速纯化,减少活性损失)。

检测与成像:

荧光显微镜(共聚焦/宽场)、流式细胞仪(405nm激发,421nm检测)或活体成像系统(如IVIS)进行信号采集。

多色实验可与Alexa Fluor 488、Cy5等荧光标记联合使用,实现多参数分析。

注意事项

储存与操作:严格避光、低温(-20℃)保存,避免高温或频繁冻融;实验全程需在避光条件下操作,防止荧光淬灭。

浓度控制:过高浓度可能导致非特异性结合,过低则影响信号强度,需通过预实验优化。

pH与缓冲液:缓冲液pH需严格控制在7.0-7.4,确保凝集素活性与荧光稳定性。

背景控制:使用BSA等封闭剂减少非特异性结合,增加洗涤次数降低背景信号。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

Alexa Fluor 405标记番茄凝集素,AF 405 Tomato lectin

关于我们:

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